莫虹斐，余 多，孙 淼，陈福勇，曹 红

（1.中国农业大学动物医学院，北京 海淀 100193；2.西北农林科技大学动物医学院，陕西 杨凌 712100）

J亚型禽白血病是由J亚群禽白血病病毒（ALV-J）引起的一种以成髓细胞增生、免疫抑制、生长发育受阻为特点的传染性肿瘤疾病［1-2］，于1988年由英国的Payne博士［3］等首次发现。该病近年来在我国的发病率呈逐年上升趋势。ALV-J基因组主要含有3个基因，即gag、pol和env，其中env基因编码的囊膜表面蛋白gp85是病毒抗原的主要成分，决定病毒亚群特异性和宿主范围［4］。2000年，秦爱建、崔治中等［5］首次在国内研制了抗J亚群禽白血病病毒囊膜糖蛋白特异性单克隆抗体，并分析了其识别的ALV-J囊膜糖蛋白的分子量为90～94kD，识别的未糖基化的囊膜蛋白分子量约为53kD；2003年，杨玉莹、秦爱建等［6］首次克隆表达了gp85基因，证明gp85蛋白具有病毒的抗原特异性。但目前国内外尚无ALV-J gp85单克隆抗体识别的具体表位的相关报道。

本试验为了初步确定ALV-J gp85单克隆抗体1E3株所识别的抗原位点，将S1株的gp85基因进行了分段克隆表达，并通过免疫印迹的方法进行分析，结果发现1E3株单抗识别的抗原表位位于gp85蛋白N端第69至112个氨基酸之间。此项研究为进一步分析ALV-J中国分离株S1的抗原性变异及gp85蛋白的抗原表位所在位点奠定了基础，为建立以表位为基础的抗原抗体诊断方法提供了必要的物质材料支持，对于深入了解ALV-J的亚群特性、致病机理以及诊断和预防均具有重要的理论和实践意义。

1 材料与方法

1.1 菌种与质粒 感受态细胞DH5α及BL21购于北京博大泰克生物基因技术有限责任公司，原核细胞表达载体pGEX-6p-1、重组质粒pET-28a-J gp85，均为本实验室保存。……