应用随机扩增多态性进行山羊致病性大肠杆菌的分子多态性分析

2011-08-08朱娟娟陈泽祥韦志锋兰美益秦若甫

中国兽医杂志 2011年12期

李军，彭昊，陶立，朱娟娟，陈泽祥，韦志锋，兰美益，秦若甫，杨威

（1.广西兽医研究所，广西南宁 530001；2.广西大学动物科学技术学院，广西南宁 530005）

山羊大肠杆菌病是一种严重危害广西山羊养殖的细菌性疾病，该病多发于数日龄至6周龄的羔羊，主要经消化道感染，引起羔羊腹泻、脱水和毒血症死亡；此外，大肠杆菌还可侵入肠壁进入血液循环系统发展成为败血型大肠杆菌病。大肠杆菌种类众多，在大肠杆菌流行病学调查和病原性研究中，人们引入分型方法对其进行研究。传统的大肠杆菌分型方法是以大肠杆菌抗原O、K、H的抗原性为基础，通过血清学方法进行分型［1-2］。由于大肠杆菌O、K、H抗原的氨基酸同源性较高，彼此间存在抗原交叉，应用血清学方法难以准确区分，给大肠杆菌的鉴定造成了困难［3］。随着分子生物学的发展，以基因为基础的分子分型方法凭着准确、敏感和分辨性高的优点克服了传统血清学分型的局限。随机扩增多态性方法（randomly amplified polymorphic DNA，RAPD）是在PCR基础上发展的一项基因分型技术，因其成本低、操作简捷、无需预先了解基因序列等优点，在生物物种全基因DNA的多态性检测分析中得到广泛应用［5-7］。本实验室在开展广西山羊细菌性疾病流行病学调查过程中发现传统血清学分型方法无法准确对临床分离的大肠杆菌进行分型，因此，本试验旨在应用RAPD技术对广西山羊大肠杆菌进行分子分型，为其流行病学研究提供技术支撑。