刘海龙 李晓强 李智琴 赵 晖* 张 琪

(1 甘肃奇正藏药有限公司，甘肃 兰州 730100；2 首都医科大学中医药学院，北京 100069)

红花如意丸具有祛风镇痛，调经血之功效，临床用于阴道炎、月经不调、痛经等多种妇科疾患。而这类妇科疾病的发生多与体内雌、孕激素水平异常有关，本实验通过腹腔注射外源性雌激素配合孕激素，建立下丘脑-垂体-性腺轴功能失调大鼠模型，在该模型上观察红花如意丸对大鼠垂体泌乳素（PRL）、孕酮（P）、雌二醇（E2）水平的影响。

1 材料与方法

1.1 动物

SPF级雌性Wistar大鼠60只，体质量180～200g，由军事医学科学院实验动物中心提供，合格证号：SCXK（军）2007-004。

1.2 药物及试剂

红花如意丸，甘南佛阁藏药有限公司，批号100102；桂枝茯苓胶囊，江苏康缘药业股份有限公司，批号091129；枸橼酸他莫昔芬片，上海复旦复华药业有限公司，批号090508；己烯雌酚注射液，上海通用药业股份有限公司，批号020701；黄体酮注射液，上海通用药业股份有限公司，090901；血清垂体泌乳素、孕酮、雌二醇放免检测药盒均由北京华英生物技术研究所提供。

1.3 仪器

放免仪器：r-911全自动放免计数仪（中国科技大学实业总公司生产）；Biofuge15R低温离心机（Heraeus sepatech德国）；JA-1003电子分析天平（上海精科天平厂）。

1.4 方法

1.4.1 分组

健康雌性Wistar大鼠70只，随机分为7组：空白对照组，模型组，他莫昔芬组，红花如意丸（0.156g/kg，0.469g/kg，1.407g/kg），桂枝茯苓胶囊组，每组10只。

1.4.2 模型制备

方法[1]除空白对照组大鼠外，其余大鼠腹腔注射雌二醇注射液，0.5mg/（kg·d），注射25d后，腹腔注射黄体酮注射液4mg/（kg·d），连续注射5d。在造模型开始连续灌胃给药30d。

1.4.3 给药方法

在造模型开始灌胃给药，红花如意丸小剂量组0.156g/kg、红花如意丸中剂量组0.469g/kg、红花如意丸大剂量组1.407g/kg、阳性对照组桂枝茯苓胶囊0.326g/kg，他莫昔芬片4.669mg/Kg，均连续用药30d。模型组、正常组灌胃给予等容量的生理盐水。

1.4.4 指标检测

末次给药后，动物禁食12h，麻醉取血，分离血清，放免法检测血清垂体泌乳素、孕酮、雌二醇。

2 结 果

和正常组相比，模型组动物血清雌二醇（E2）、垂体泌乳素（PRL）显著增高（P＜0.01）；红花如意丸（1.407g/kg）、他莫昔芬均能明显下调雌二醇的浓度，和模型组相比差异显著（P＜0.01或P＜0.05）；红花如意丸（0.469g/kg、1.407g/kg）、桂枝茯苓胶囊组大鼠垂体泌乳素（PRL）含量均明显低于模型组（P＜0.01或P＜0.05）。见表1。

表1 红花如意丸对血清垂体泌乳素、孕酮、雌二醇的影响（±s）

表1 红花如意丸对血清垂体泌乳素、孕酮、雌二醇的影响（±s）

注：与模型组比较1）P＜0.05，2）P＜0.01

垂体泌乳素(ug/L)正常 10 38.83±8.402) 9.98±1.62 12.13±4.052)模型 10 51.97±11.51 9.84±1.82 19.09±6.36红花如意丸 0.156 9 49.60±8.67 10.40±1.64 17.10±6.46红花如意丸 0.469 9 47.78±13.41 11.78±1.91 13.21±6.761)红花如意丸 1.407 9 38.92±9.642) 11.13±2.34 11.20±3.812)桂枝茯苓胶囊 0.326 9 46.23±9.71 10.36±1.80 10.35±4.082)他莫昔芬 0.005 9 40.54±9.801) 9.86±1.78 15.00±5.83组别 剂量(g/kg)n 雌二醇(ng/L)孕酮(ug/L)

3 讨 论

临床研究表明，红花如意丸具有明显抗痛经，治疗盆腔炎症，改善盆腔粘连作用。生理状态下，体内雌二醇水平和孕酮水平在生殖内分泌功能稳定和维持方面具有十分重要的意义。临床女性生殖内分泌疾病如月经失调、闭经、不孕、子宫肌瘤、子宫内膜异位症等妇科疾患的发生多与体内雌、孕激素水平异常有关[2-4]。

雌激素可刺激大鼠垂体泌乳素细胞增生和垂体泌乳素分泌增加，垂体泌乳素含量增加不仅能直接刺激乳腺组织增生，而且进一步抑制孕激素的分泌，刺激雌激素的生成，本实验长期给予外源性雌激素配合孕激素腹腔注射后，模型大鼠出现丘脑-垂体-性腺轴功能失调，血清雌二醇，垂体泌乳素含量均较正常组明显提高（P＜0.01）。西医常采用雌激素受体部分激动剂他莫昔芬与雌二醇竞争雌激素受体，从而达到减弱雌激素作用的目的[5,6]。本次实验观察到他莫昔芬可明显降低雌、孕激素负荷大鼠血清雌二醇水平，较模型组差异显著（P＜0.05），但血清垂体泌乳素和模型组相比没有明显差异。红花如意丸和桂枝茯苓胶囊均能降低雌、孕激素负荷大鼠垂体泌乳素含量，红花如意丸（1.407g/kg）还可明显下调血清雌二醇含量。本次研究结果，提示红花如意丸可通过调节垂体-性腺系统功能，改善机体内分泌环境。对改善痛经、持续下腹痛及月经异常症状，防止子宫内膜受损，可能具有独特的效果，相关作用及机理有待于深入研究。

参考文献

[1]黄国钧,黄勤挽.医药实验动物模型-制作与应用[M].北京:化学工业出版社,2008:572.

[2]高婉丽,冯力民,张铭,等.绝经期乳腺癌妇女服用他莫昔芬后子宫内膜雌、孕激素受体变化及Ki-67的表达[J].首都医科大学学报,2005,26(5):600.

[3]潘凌亚,吴葆桢,韩美玲.子宫内膜异位症流行病学研究现状[J].中华妇产科杂志,1992,27(5):305.

[4]陈忠年,杜心谷,刘伯宁.妇产科病理学[M].上海:上海医科大学出版社,1996:268.

[5]孙呈勇,田进.垂体泌乳素的基础研究[J].中国性科学,2006,15(2):33.

[6]冯光荣,陶文静.益气化瘀法对子宫肌瘤患者血清雌、孕激素水平影响的研究[J].中医研究,2009,22(7):52.