梁 豪， 李志军， 张建国， 程远合， 孙国贤， 肖 飞， 王晓辉， 王晓彬

癌基因的激活与抑癌基因的失活共同导致肿瘤的发生、发展。p27是最近几年发现的抑癌基因，国内外许多研究发现其表达蛋白P27在肿瘤细胞中的表达明显降低或消失，表达量与肿瘤的病理分级呈负相关。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是一种作用强、特异性高的内皮细胞有丝分裂原，其通过与内皮细胞膜上的受体结合而引起一系列的信号转导，刺激血管内皮细胞增殖，诱导新生血管生成，在肿瘤发展、转移过程中同样发挥重要作用。本研究拟采用免疫组化SP法检测膀胱移行细胞癌与正常组织中P27、VEGF的表达情况，探讨二者在膀胱移行细胞癌发生、发展及转移过程中的作用，为膀胱癌的诊断及临床治疗提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象及分组 收集2008—2010年河南科技大学第一附属医院泌尿外科手术切除的60例术后病理检查为膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell carcinoma，BTCC)的组织作为BTCC组，其中男38例，女22例，年龄45～75岁，平均年龄58岁。按WHO分级标准:G1级24例，G2级21例，G3级15例;临床分期按2002年UICC的TNM分期标准分为:浅表性癌(Ta～T1)39例，浸润性癌(T2～T4)21例。同时选择10例取自耻骨上经膀胱前列腺摘除手术的正常膀胱组织作为对照组。BTCC组与对照组的年龄及性别无显著差异，具有可比性。

1.2 方法 鼠抗人VEGF单克隆抗体(即用型)，鼠抗人P27单克隆抗体(即用型)及SP试剂盒均购自福建迈新生物技术开发公司;免疫组化步骤按过氧化物酶标记链霉素抗生物素(SP)法进行。

1.3 阳性判断标准 在胞膜和胞质内出现明显棕黄色颗粒者为VEGF阳性细胞;在胞核内出现明显棕黄色颗粒者为P27阳性细胞。……