黑龙江省瓜类白粉病菌IGS-RFLP分析
2011-08-07魏尊苗王学征栾非时
魏尊苗 王学征 高 鹏 栾非时
(东北农业大学园艺学院,黑龙江哈尔滨 150030)
白粉病是一种广泛发生的世界性病害,在甜瓜、西瓜、黄瓜、南瓜等葫芦科作物上均可严重发生。单丝壳白粉菌Podosphaera xanthii(原用名Sphaerotheca fuliginea)和二孢白粉菌Golovinomyces cichoracearum(原用名Erysiphe cichoracearum)(Cohen et al.,2004)是瓜类白粉病的主要病原菌(Davis et al.,2002),P. xanthii分化为11个生理小种,分别为小种0、1、2US、2France、3、4、5、N1、N2、N3 和 N4(Vakalounakis et al.,1994);G. cichoracearum分化为 2个生理小种(James & Creight,2002),分别为小种0和小种1。白粉病菌的种类多、分布广、形态特征复杂,传统的形态特征分类方法常引起诸多意见分歧。与传统鉴别寄主鉴定白粉病菌生理小种相比,利用分子生物学手段鉴定白粉病菌可以克服很多外界因素,使结果更科学准确。
核糖体DNA(rDNA)的编码区序列具有保守性而非编码区变异丰富,分析真菌核糖体基因是进行真菌分类鉴定和系统发育的有效方法(Bruns et al.,1991)。rDNA基因间隔区(IGS,intergenic spacer)被认为是rDNA中变异最快的区域(Paule & Lofquist,1996),是检测真菌种群或个体间遗传关系的有效变异序列,是真菌属内种间比较和种内变种遗传多样性分析的重要分子标记(Sugita et al.,2001)。近年来已逐渐用于微生物种水平以下的鉴定、分类,Sugita等(2003)利用IGS测序鉴定菌株并研究其亲缘关系;张金霞等(2004)、黄晨阳等(2005)利用IGS-RFLP对侧耳菌株进行鉴别;Bunyard等(1996)研究了栽培种双孢蘑菇、香菇和平菇的IGS,结果表明各个栽培种内不同菌株的IGS有丰富的多态性。应用 IGS-RFLP对瓜类白粉病菌菌株进行遗传学分析和菌株鉴定尚未见报道,本试验目的在于应用分子生物学技术对黑龙江省瓜类白粉病菌进行遗传多样性研究,在DNA水平上分析白粉病菌菌株的基因遗传学差异,以期对白粉病菌的鉴定提供稳定快速有效的技术方法。……
