浸提方法对药用卤化丁基橡胶塞体外细胞毒性评价的影响

2011-08-07邝辉曹苹王晓炜深圳市药品检验所深圳518057

中国医疗器械信息 2011年7期

邝辉曹苹王晓炜深圳市药品检验所 (深圳 518057)

卤化丁基橡胶塞因其具有优良的化学惰性以及气密性而广泛用于药品包装。卤化丁基橡胶塞与内装药物的相容性自始就是各生产企业关注的重点，同时其生物安全性也逐渐引起人们的注意。体外细胞毒性实验是生物安全性评价的重要组成部分，是评价直接或间接接触人体组织和细胞的医疗器械和药品包装材料的通用方法[1]。目前我国药品包装材料相关标准推荐的方法有：相对增殖度法、琼脂扩散法、直接接触法、浸提法[2]。浸提液实验是目前用于检测药品包装材料细胞毒性的比较广泛的一种方法，选择不同的浸提方法可能对实验结果有着直接的影响。本实验遵循药品包装材料的生物学评价相关标准，经不同的浸提方法制备相应的浸提液，以MTT 比色法[3]作为主要检测手段评价卤化丁基橡胶塞浸提液对细胞的毒性，重点考察不同的浸提方法对各企业生产的卤化丁基橡胶塞细胞毒性评价的影响。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器

小鼠成纤维细胞L929(中国典型培养物保藏中心，CCTCC)，CO2细胞培养箱(Thermo Forma)，倒置相差显微镜(Lecia)，Multiskan Spectrum酶标仪(Labsystems)，Milli-Q纯水系统，恒温恒湿培养箱(Binder)，针式过滤器(Pall)，胎牛血清(Gibco)，MEM培养液(Sigma)，胰蛋白酶(Gibco)，噻唑蓝(MTT，Sigma)，DMSO(Amresco)，11批药用卤化丁基橡胶塞，高密度聚乙烯(北京第一制药厂)。