李 杰，张淑二，刘怡孝，石国庆，管 峰,4*

(1.中国计量学院生命科学学院，浙江杭州310018；2.山东省畜牧总站，山东济南250022；3.新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室，新疆石河子832000；4.中国计量学院植物环境生物学与检测技术研究所浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室，浙江杭州310018)

朊蛋白(Prion protein，PrP)也被称为朊病毒，为糖蛋白。PrP的空间结构变异被认为是多种人畜共患朊蛋白病的主要原因，如羊痒病、牛海绵状脑病、人库鲁氏病和克雅氏病等。

哺乳动物中PrP编码基因(Prion protein gene，PRNP)是一个高度保守的基因。对绵羊PRNP的研究表明，编码区136位、154位和171位密码子遗传多样性与绵羊对痒病易感性/抗病性高度相关[1]。牛PRNP多样性研究比绵羊晚，但也有研究表明牛PRNP多样性与PrP的表达以及疯牛病(BSE)的抗性/易感性相关[2-5]。在牛PRNP的多态位点中，启动子区23 bp、内含子1中12 bp和翻译区序列中一个24 bp片段的插入/缺失多样性影响其抗病性[3-5]。

本研究以荷斯坦公牛为实验对象，分析PRNP序列中12 bp、23 bp和24 bp片段插入/缺失多样性、不同基因型群体mRNA转录水平以及与公牛的鲜精活力、冻后活力和采精量等指标的关系，为牛的抗病性评估和抗病育种研究提供依据。

1 材料和方法

1.1 精液、试剂及仪器 荷斯坦种牛的精液(68头份)取自山东省畜牧总站良种推广中心，公牛年龄3周岁～5周岁，按照公牛饲养标准常规饲养，自由饮水，每天运动约2 km，每周采取假阴道人工采精法采精两次，每年的8月停止采精一个月。

对采集的公牛精液，通过精子密度测定仪(Accucell 1145，法国大……