王振全，罗宝正，薄清如，徐海聂，沙才华，廖秀云，陈伟生

(1.吉林大学农学部畜牧兽医学院，吉林长春130062；2.珠海出入境检验检疫局国家外来病检测重点实验室，广东珠海519015)

H5亚型禽流感病毒(Avian influenza virus serotype H5， AIV-H5)、狂犬病病毒(Rabies virus，RV)、猪链球菌2型(Streptococcus suis2)、炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)、沙门氏菌(Salmonella)、大肠杆菌O157(Escherichia coliO157)6种动物源性人兽共患传染病病原给人们的健康和生活造成了很大的危害。但是目前对于上述病原的检测多以一种或少数几种细菌或病毒为主，很少将人兽共患的细菌和病毒同时检测。在进出境口岸检验过程中对冷冻肉类及蛋类制品往往要求多个项目同时进行，可能同时涉及到检验多种细菌和病毒。在这种情况下，传统的检验方式难以满足快速、精确的检验要求。

基因芯片是具有高通量、集成化、微型化、自动化并且快速、特异性强等特点，目前已广泛应用于病原微生物检测[1-3]、细菌耐药性监测与药物筛选[4]、基因多态性和基因突变分析[5-7]、转基因食品检测[8-9]等领域。本研究根据基因芯片核酸分子杂交的原理，建立一种可同时检验上述6种病原体的快速、灵敏、特异的基因芯片方法，为口岸检测及工商执法提供技术支撑。

1 材料和方法

1.1 病毒株和菌株 H5N1 AIV灭活病毒株购自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所；RV、甲型H1N1流感病毒、犬瘟热病毒(CDV)和犬细小病毒(CPV)均为疫苗毒；S.suis2灭活抗原购自江苏出入境检验检疫局；Salmonella、大肠杆菌E.coliO157、志贺氏菌(Shigella)、单增李斯特菌(L.monocytogenes)、H4N6和H6N2 AIV株由珠海出入境检验检疫局分离保存；炭疽芽孢杆菌(B.anthracis)的阳性模板使用合成DNA的克隆菌。……