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发酵床猪场猪蓝耳病和猪传染性胸膜肺炎混合感染的诊治

2011-08-06陈宏智

猪业科学 2011年7期
关键词:放线琼脂猪只

刘 涛,王 瑞,陈宏智

(信阳农业高等专科学校动物科学系,河南 信阳 464000)

猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起猪的一种高度接触性传染病,以母猪发生流产,产死胎、弱胎、木乃伊胎以及仔猪呼吸困难、高死亡率等为主要特征[1]。猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起猪的一种高度接触性呼吸道传染病,临床上以急性纤维素性胸膜肺炎或慢性局灶性坏死性肺炎为特征,急性者病死率高[2]。

1 发病情况

信阳某发酵床猪场存栏母猪300多头,自繁自养。2011年3月,该猪场饲养在发酵床上的300多头体重50~70 kg左右的育肥猪发生以呼吸困难、采食量下降、皮肤发绀、急性死亡等为主要特征的传染性疾病。此批发病猪集中在三栋育肥舍内,发病率约30%,病死率为10%。

2 临床症状

病猪表现精神沉郁,食欲不振或废绝,体温升高到41~42 ℃,呼吸困难、腹式呼吸明显、喘气,严重者呈犬坐式,随着病程发展,部分猪只皮肤变紫,耳、臀、腹部、四肢发绀(见图1-2)。

3 病理变化

剖检可见肺脏充血、淤血,呈暗红色,肺间质增宽,呈水肿样,肺表面有大量出血斑点和大片红色肝变样病灶(见图3—4)。肺切面湿润,从支气管断端流出较多的泡沫样液体。气管充斥着黄色黏液、肠系膜淋巴结索样肿大、其他各处淋巴结有不同程度的出血和坏死变化,脾脏显著肿大,脾头卷曲,表面可见暗红色质地较硬的出血性梗死。

4 实验室诊断

4.1 涂片镜检

无菌取心血、肝、肺涂片,革兰氏染色均可见革兰氏阴性小杆菌。

4.2 病原分离培养

无菌取病(死)猪心血、肝脏、脾脏、肺脏(病变区与正常组织交界处)、肾脏、胸腔积液接种于巧克力琼脂、鲜血琼脂、普通琼脂培养基,37 ℃烛缸培养24 h。巧克力琼脂培养基长出圆形、边缘整齐、直径约0.5 mm的菌落,鲜血琼脂培养基长出圆形、β型溶血、针尖状大小菌落,普通琼脂培养基无菌落生长。

4.3 CAMP试验(卫星试验)

在兔鲜血琼脂培养基上用金黄色葡萄球菌划一直线,将纯化菌与金黄色葡萄球菌作垂直划线但不接触,37 ℃培养24 h,可见金黄色葡萄球菌周围出现加强的溶血带,呈典型的CAMP现象。

图1 猪群扎堆

图2 腹部皮肤发红

图3 肺脏切面充满泡沫

图4 肺脏大片红色肝变样病灶

4.4 V因子依赖试验

将纯化菌分别接种于普通琼脂培养基和含0.01%NAD的普通琼脂培养基,37 ℃培养24 h,含NAD的普通琼脂培养基长出灰白色、半透明、边缘整齐、直径约0.5 mm的菌落,不含NAD的普通培养基上无菌落生长。

4.5 生化试验

分离菌发酵葡萄糖、麦芽糖、鼠李糖、蔗糖、木糖产酸,不发酵乳糖、阿拉伯糖、棉子糖、海藻糖、甘露醇、卫矛醇、山梨醇、肌醇,触酶、尿素酶、丙二酸盐、鸟氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶、精氨酸脱羧酶、精氨酸双水解酶阳性,氧化酶、硫化氢、七叶苷、水杨素、侧金盏花醇、枸橼酸盐利用、硝酸盐还原、M.R试验、V-P试验、靛基质试验阴性,具有胸膜肺炎放线杆菌的生化特性,说明分离菌是胸膜肺炎放线杆菌[3]。

4.6 药敏试验

分离菌对丁胺卡那霉素敏感,对环丙沙星、诺氟沙星、复达欣中敏,对头孢噻呋、庆大霉素、恩诺沙星、卡那霉素、复方新诺明、氨苄西林、羧苄青霉素、先锋霉素V、强力霉素、四环素等不敏感。

4.7 分子生物学诊断

1)无菌采集病死猪的肺、脾、淋巴结组织,用RT-PCR检测猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株(引物序列和具体检测方法见参考文献[4]),结果见图5。由图5可见,猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株为阳性,猪瘟病毒为阴性。

2)采集呼吸道症状较为典型猪只血清10份,采用间接ELISA检测方法,检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体值,见表1。

5 防治

将发病猪转移至隔离舍,采用地圈饲喂,带猪消毒。原发酵床进行消毒,疫情平息后,重新添加新鲜发酵床菌种。使用丁胺卡那霉素6~8 mg/kg,肌肉注射,每日2次,连用3~5 d。1 t饲料中添加清开灵粉1 000~1 500 g、抗菌肽200 g,连续饲喂12 d。维生素C 3~5 mg/kg,肌肉注射,每日2次,连用5 d。

表1 猪繁殖与呼吸综合征病毒ELISA抗体

图5 PRRSVRT-PCR与猪瘟病毒的RTPCR检测结果

经过上述治疗,同时加强饲养管理7 d后,猪群发病率、死亡率降低,病情得到较好控制。

6 讨论与分析

1)因为该场未进行猪繁殖与呼吸综合征疫苗的免疫,其抗体阳性率很高,结合实验室病原检测可以初步确定引起本次猪只发病死亡的主要病原性病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒,并存在猪传染性胸膜肺炎的混合感染。

2)该场大群发病前3 d,本地区适逢天气降温,房舍保温和通风条件一般。因该场采用发酵床饲养肥猪技术,据笔者观察,猪只习惯用鼻吻拱发酵床地面,可以清晰的看到鼻孔处粘带有许多锯末,诱发猪只咳嗽现象明显。因该技术不适合消毒,所以发病期间猪圈并未消毒,加速了病原的蓄积与扩散。

3)本猪场分离菌对丁胺卡那霉素敏感,对头孢噻呋不敏感。因此,该场最开始使用头孢曲松钠来治疗,是不对症的。临床分离的致病菌株要进行药敏试验,筛选敏感药物,从而为疫病的预防和治疗提供依据。

4)PRRSV可使猪免疫功能受损,易引发一些细菌继发感染,猪繁殖与呼吸综合征病毒和胸膜肺炎放线杆菌混合感染时,病情会难以控制且病程较长,从而给治疗增加难度。

5)通过实验室检测,该场已经是猪蓝耳病阳性场。今后该场最好对种猪群和育肥猪群进行猪蓝耳病疫苗的免疫。必要时,对肥猪进行猪传染性胸膜肺炎疫苗的免疫。

[1] 陆承平.兽医微生物学[M].北京:中国农业出版社,2001: 254-256.

[2] 白文彬,于康震.动物传染病诊断学[M]. 北京:中国农业出版社,2002:476-483.

[3] 王亚军,段艳萍,邱翔宇.猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离与鉴定[J].兽医导报,2008(17):17-18.

[4] 周海范,夏平安,崔保安,等.猪繁殖与呼吸综合征病毒河南分离株ORF5基因的克隆与变异分析[J].中国兽医学报,2007(6):810-813.

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