复方首乌软胶囊对D-半乳糖致亚急性衰老小鼠p16基因表达的影响*
2011-08-06谭喜莹王淑云朱萱萱
姚 毅,谭喜莹,王淑云,朱萱萱
江苏省中医院,南京 210029
复方首乌软胶囊是江苏省中医院传统中药制剂,主要由赤白首乌、地黄、牛膝、桑椹、女贞子、墨旱莲、桑叶、菟丝子、金樱子、黑芝麻、金银花等14味中药组成,具有补肝肾、强筋骨、乌须发的功效。临床实践表明,复方首乌软胶囊具有良好的抗衰老作用。药理实验证明,复方首乌软胶囊具有降低机体耗氧量,增加供氧量的作用,可明显延长小鼠游泳时间[1]。复方首乌软胶囊还可以增强机体内源性抗衰老物质SOD活性,从而抑制自由基对细胞的损害[2]。近年来的研究表明,基因是主导生物衰老过程的主要原因,衰老过程中多数原癌基因的表达或产物活性降低,抑癌基因则相反。p16基因是一种主要抑癌基因,p16的积累是衰老的诱因。抑制p16的表达,虽然不激活端粒酶,但是能减慢端粒的缩短,并增强DNA损伤修复能力,从而延缓了衰老的进程[3]。本实验采用D-半乳糖诱发的亚急性衰老模型,采用荧光定量PCR(Realtime-PCR)法检测小鼠脑中p16基因的表达,探讨复方首乌软胶囊对衰老基因p16表达的影响,进一步阐明复方首乌软胶囊抗衰老作用的生物学基础。
1 材 料
1.1 药品
复方首乌软胶囊(江苏省中医院制剂部);活力苏口服液(主要成分:制何首乌、淫羊藿、黄精、枸杞、黄芪、丹参;成都地奥集团天府药业股份有限公司,批号:100202);D-半乳糖(美国 Sigma公司,批号:G-0625);Trizol试剂 (Invitrogen公司);AMV反转录试剂盒(Promega公司);Realtime-PCR引物由南京金思瑞生物公司合成;SYBR Green I核苷酸胶体染料(Invitrogen 公司);Taq PCR Master Mix Kit(Qiagen公司)。
1.2 动物
ICR小鼠,由扬州大学提供,合格证号:苏SCXK(苏)2007-0001。……
