徐 芳 魏桂荣

徐 芳,魏桂荣

湖北省襄阳市中心医院神经科,襄阳441021

脑缺血再灌注(Ischemia and Reperfusion,I/R)是脑组织损伤的重要机制,既往研究发现,脑缺血可诱导基质金属蛋白酶-9(Matrix Met-alloproteinase,MMP-9)表达,通过促进细胞外基质(Extracellular Matrix,ECM)降解和再灌注后血脑屏障开放,引起脑出血、脑水肿和白细胞浸润,最终导致神经功能损伤[1]。姜黄素是一种多酚类化合物,具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤效应[2]。本研究通过动态观察大鼠I/R及姜黄素处理对血脑屏障通透性和MMP-9表达的影响,探讨姜黄素的脑保护作用及可能机制,为临床用药提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

姜黄素、伊文思蓝(EB)购自美国Sigma公司,兔抗鼠MMP-9单抗购自美国Santa Cruz公司,其余试剂为国产分析纯。

1.2 实验动物及分组处理

雄性SD大鼠,体重180～250g,购自华中科技大学统计医学院实验动物中心。随机分为3组(n均=6):假手术组、脑I/R模型组(模型组)和姜黄素组。模型组大鼠参照Longa等[3]报道的线栓法加以改进,建立局灶性脑I/R模型,栓线采用尼龙鱼线,直径0.26～0.28mm,长4.0cm。以10%水合氯醛腹腔注射麻醉后,仰卧固定大鼠,分离并暴露左侧颈总及颈内、外动脉,尼龙鱼线从颈外动脉至颈内动脉插入大脑中动脉遇阻即止,进线长度18～20mm,栓塞成功的大鼠在缺血后2h拔除尼龙鱼线至颈外动脉残端内,恢复血流灌注。假手术组大鼠术后插入线栓深度为10mm,不形成栓塞。姜黄素组在缺血前1h腹腔注射姜黄素200mg/kg,随后每12h腹腔注射姜黄素60mg/kg,共5次。各组大鼠于再灌注后3h、24h、72h测定脑组织含水量和EB含量。之后断头取脑,迅速液氮保存备检MMP-9。……