抵抗素基因多态性与中国东北地区汉族老年人群2型糖尿病患病的相关性
2011-08-02孙亚东吉林省人民医院内分泌科吉林长春130021
孙亚东 马 彦 杨 乐 (吉林省人民医院内分泌科,吉林 长春 130021)
2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)主要与胰岛素抵抗和胰岛β细胞分泌胰岛素的功能受损有关。抵抗素作为一种新发现的脂肪组织分泌的肽类激素,成为近年来的研究热点,其功能是对抗胰岛素作用,导致机体胰岛素抵抗。抵抗素的表达受多种因素的调节,如年龄、性别、营养状态、激素、局部因子及药物等〔1〕。因此本文对抵抗素基因在中国东北地区老年T2DM患者中进行单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)进行检测,探讨中国东北地区汉族老年人群中抵抗素基因的多态性与T2DM的相关性。
1 资料与方法
1.1 临床资料 所有研究对象均来自于我院内分泌科2009年3月至11月住院患者及体检中心健康体检者,均为中国东北汉族地区老年人群。T2DM组:115例(男59例,女56例),年龄60~71〔平均(64.28±6.77)〕岁,体重指数(23.1±2.81)kg/m2,诊断符合1999世界卫生组织(WHO)的诊断标准:空腹血糖(FPG)≥7.0 mmo1/L及/或餐后2 h血糖≥11.1 mmol/L,均除外原发性心肺疾病、脑血管疾病、T2DM大血管并发症以及微血管并发症。正常对照组:99例(男51例,女48例),年龄60~70〔平均(63.86±6.23)〕岁,均为本院体检中心健康体检者,追问病史、体检、实验室及心电图检查,排除糖尿病、脑血管疾病、心肺疾病及肾脏疾病等。所有入选者抽外周血5 ml,按酚/氯仿法抽提DNA,并首先随机选取其中20例T2DM患者DNA作为筛查SNP的样本。
1.2 方法〔2〕所有入选者抽外周血5 ml,按酚/氯仿法抽提DNA,并首先随机选取其中20例T2DM患者DNA作为筛查SNP的样本。
1.2.1 SNP检测 聚合酶链反应(PCR)在96孔薄壁板中进行。PCR反应体系为25 μl,包含10 ng人基因组 DNA,10×PCR 缓冲液 2.5 μl,25 mmol/L MgCl22 μl,10 mmol/L dNTP 0.5 μl,20 μmol/L 引物 0.4 μl/对,5 U/μl TagDNA 酶 0.2 μl。PCR仪为Prkin-Elmer-Cetus9700。PCR反应条……
