陈苗苗 李志洁 (郑州大学第二附属医院儿科，河南 郑州 450014)

支气管哮喘是一种由多种细胞(嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞及气道上皮细胞等)和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病，其病理特点是嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润，黏液分泌增多和气道狭窄等。哮喘的机制十分复杂，其中Th1与Th2平衡失调是哮喘的重要发病机制。近年研究发现，Toll样受体(toll-like receptors，TLRs)是一类I型跨膜蛋白介导的天然免疫模式识别受体，其中TLR7是其中的重要成员之一。M¨oller-Larsen等〔1〕研究发现TLR7基因与哮喘密切相关，TLR7能特异性识别人工合成的小分子免疫调节剂咪喹莫特，识别后能上调其表达并能进一步诱导Th1类细胞因子IL-12、抑制Th2类细胞因子IL-13的产生，以维持机体免疫功能的平衡。本文以哮喘小鼠为动物模型，利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定肺组织中TLR7 mRNA的表达水平，并测定肺泡灌洗液中IL-12和IL-13的浓度，旨在探讨咪喹莫特治疗哮喘的主要作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 4周龄清洁级雌性BALB/C纯系小鼠30只，体重15～20 g，购自郑州大学实验动物中心。

1.1.2 设备与制剂 咪喹莫特(上海特化医药有限公司)，鸡卵白蛋白(OVA，美国Sigma公司)，小鼠IL-12和IL-13 ELISA试剂盒(美国R＆D公司)。小鼠TLR7引物序列，上游:cctcaaggctcagaagat，下游:cccactaacaccaccaat。Trizol、逆转录试剂盒、dNTP、Taq DNA聚合酶、Trans DNA Marker I(北京全式金生物有限公司)，引物(北京三博远志生物技术有限责任公司)，低温冰箱(SANYO公司)，低温离心机(Sigma公司)，无菌操作台(苏州净化设备有限公司)，酶标仪(Multiskan MK3，Thermo Labsystems公司)，PCR仪(珠海黑马医学仪器有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 实验动物分组与模型建立 SPF级雌性BALB/C系小鼠30只随机分成3组，每组10只。……