姜维华 朱辛明 杨志平 朱 晴 马春园 黄宇鹏 林明轩

(北华大学附属医院，吉林 吉林 132001)

肿瘤侵袭和转移是恶性肿瘤的主要表现之一，细胞外基质(ECM)和基底膜(BM)构成肿瘤转移的重要屏障。近年来研究发现，乙酰肝素酶(Hpa)可特异性降解ECM和BM的主要成分——硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(heparan sulfate proteogly-can，HSPG)，并且协同多种因子直接和间接地促进肿瘤的侵袭和转移〔1〕。Hpa在多种恶性肿瘤中表达水平高于其来源的正常组织，但胃癌(GC)组织中Hpa表达研究较少。本实验研究GC患者术后癌组织标本中Hpa的表达状况，分析Hpa表达与临床病理因素的关系，并探讨其在GC侵袭和转移中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 标本来源 收集北华大学附属医院病理科2009～2010年手术切除的胃腺癌石蜡包埋标本60例，其中男52例，女8例;年龄32～79岁，中位年龄52岁。所有病例术前均未行放、化疗，且均经病理学诊断证实。按照WHO对GC的分级标准，高分化5例，中分化18例，低分化37例;按照1997年国际抗癌联盟(UICC)TNM分期法(第5版)进行分期:Ⅰ+Ⅱ期34例，Ⅲ+Ⅳ期26例;有淋巴结转移32例，无淋巴结转移28例;10例距肿瘤组织5 cm以上的正常组织作为对照。

1.1.2 主要试剂 Hpa兔抗人多克隆抗体，购于博士德生物有限公司。链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)试剂盒、二氨基联苯胺(DAB)显色剂购于北京中山生物有限公司。

1.2 方法

1.2.1 检测方法 4 μm厚石蜡切片，采用SP连接免疫组织化学方法检测Hpa蛋白的表达。用已知阳性的GC切片作阳性对照，已知阴性的GC切片作阴性对照。用已知阳性的GC切片，以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作空白对照。……