MDM2-p53通路在肺腺癌中的表达及其调控机制
2011-08-02戴文鑫雷怀定吴智勇冯光球
戴文鑫 雷怀定 吴智勇 郑 茵 陈 娟 冯光球
(海南省人民医院留医部省医疗保健中心四区,海南 海口 570311)
p53介导的细胞信号转导途径与细胞内其他信号转导通路间存在着错综复杂的相互关系,不能独立的衡量p53的生物学功能〔1〕,而应将各个与之相关的基因综合起来研究其体系,信号转导途径中任何一个环节的障碍都将影响其功能,导致细胞周期失控、基因不稳定、甚至肿瘤发生。双微粒体2(murine double inute 2,MDM2)是一种进化上保守的癌基因,MDM2是目前研究比较广泛的癌基因之一,在多种肿瘤中可以检出,在功能上与p53基因密切相关。研究肺癌不同类型组织中MDM2蛋白增高表达率腺癌最高。2003年3月至2005年10月,本研究针对肺腺癌患者,通过癌组织中MDM2、p53表达的检测,进行MDM2-p53通路的表达及其意义的探讨。
1 资料与方法
1.1 标本 41例肺腺癌标本均取自湖北十堰太和医院呼吸内科2003~2005年支气管镜下活检组织。41例病例中,男24例,女17例,年龄23~71岁,均为首次确诊病例,确诊前未行化疗、放疗和其他生物免疫治疗;TNM分期,Ⅰ期5例,Ⅱ期11例,Ⅲ期12例,Ⅳ期13例。所有标本均经10%甲醛溶液浸泡固定,常规石蜡包埋保存。
1.2 试剂 一抗分别为1∶100稀释的鼠抗人PCNA单克隆抗体、鼠抗人MDM2单克隆抗体、鼠抗人p53单克隆抗体(均为Santa Cruz Biotechnology,Inc产品)。用PBS代替一抗做阴性对照;10%封闭用正常山羊血清、生物素化二抗工作液、抗辣根过氧化物酶标记的链霉素卵蛋白素及DAB显色试剂盒均购自Dako公司。原位细胞凋亡检测试剂盒(POD)为美国罗氏公司原装试剂盒,购自天津津脉基因测绘技术有限公司。……
