陈建兰，李庆山△，王汉平，应 逸，杜庆华，许艳丽，陈晓燕，谢健晋，毛 平，李志鹏

(1广州医学院附属市一人民医院血液科，广东 广州 510180;2厦门大学生命科学学院分子诊断学实验室，福建 厦门 361005)

在急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia，AML)分层治疗的研究中，Fms样酪氨酸激酶3(Fms-like tyrosine kinase 3，FLT3)基因近膜区的内部串联重复(internal tandem duplication，ITD)是最早被识别的分子标记之一，其存在与否被认为对AML的预后具有重要的判断价值。有研究认为[1，2]，FLT3-ITD的这种预测价值与突变等位基因的比例有关，疾病复发率(relapse rate，RR)、无病生存率(disease-free survival，DFS)和总体生存期(overall survival，OS)随着突变比例的升高均有恶化趋势，且高白细胞也在高突变比例中更加突出，高比例突变的FLT3-ITD预测价值显得更大，因而定量分析FLT3-ITD尤为重要。通常情况下由于毛细管电泳法(capillary electrophoresis，CE)的高效性和高敏感性，FLT3-ITD相对定量分析主要是采用此法[3]。变性高效液相色谱技术(denaturing high-performance liquid chromatography，DHPLC)已经用于检测慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia，CML)ABL激酶区点突变[4]，且技术方法稳定可靠，而少见DHPLC用于检测FLT3-ITD，故我们尝试运用DHPLC技术建立相对定量检测FLT3-ITD突变比例的方法，对121例临床病例进行检测，并与CE分析结果进行了比较，最后对比测序结果。

材料和方法

1 材料

1.1 研究对象 为患者，共121例，其中40例来自2007年1月-2010年12月我院住院或门诊初治经细胞形态学、免疫组织化学染色及流式细胞术免疫学分型并参照《血液病诊断及疗效标准》[5]确诊为原发性 AML病例，其余81例来自2007年1月-2010年12月厦门大学中山医院与第一附属医院的住院或门诊初治同上确诊为AML病例，由厦门大学生命科学学院分子诊断学实验室提供。……