罗 文， 李悦山

(广州医学院药理学教研室，广东 广州 510182)

急性心肌梗死后，临床上主要的治疗思路是“尽快溶栓再灌注”，但是对于缺血引发的心肌细胞凋亡［1］，目前没有相应的治疗方法。环氧化酶2(cyclooxygenase 2，COX－2)作为一种重要的炎症反应介质，在正常的心肌细胞中含量非常低，但是当受到缺血、缺氧等刺激时会诱导性表达增高，在心肌缺血性损伤中发挥重要调节作用［4－10］。目前，关于COX－2是心肌缺血损伤过程中的保护因子还是有害因子争论较大。曲美他嗪(trimetazidine，TMZ)是一种新型的细胞保护剂，能优化缺血时心肌细胞的能量代谢，在早期缺血/再灌注损伤中有抗细胞凋亡的作用［3］，而在急性心肌梗死中是否同样具有抗心肌细胞凋亡的作用未见报道。本研究选用大鼠急性心肌梗死模型，使用改善心肌能量代谢的TMZ和选择性COX－2抑制剂帕瑞昔布钠(parecoxib sodium)分别单独给药和联合给药治疗，观察它们是否能对急性心肌梗死大鼠心脏细胞发挥保护作用，并初步探讨其机制。

材料和方法

1 材料

1.1 主要试剂 注射用帕瑞昔布钠(美国辉瑞制药有限公司)，盐酸曲美他嗪片(天津施维雅制药有限公司)。总RNA提取试剂Trizol(TaKaRa)，RT试剂盒(广州莱德尔公司)，PCR loading dye mix(TaKa-Ra)。GAPDH(glyceraldehyde－3－phosphate dehydrogenase)、Bcl－2(B －cell leukemia/lymphoma －2)、Bax(Bcl－2 －associated protein X)引物均由Invitrogen合成。COX －2、Bax、Bcl－2、cleaved caspase－3(CC－3)Ⅰ抗购于 Santa Cruz。Caspase－3分光光度法检测试剂盒购于南京凯基生物。DNA ladder凋亡检测试剂盒购于碧云天生物技术研究所。

1.2 动物 健康雄性SD大鼠80只，250－300 g，雌雄不限，购于广东省医学实验动物中心。

2 方法

2.1 动物模型制备 大鼠麻醉后，使用气管插管辅助呼吸。观察正常心电图。开胸暴露心脏后，用6－0丝线结扎冠状动脉左前降支(left anterior descending，LAD)。……