刘 蕾， 曲章义， 王淑秋， 魏凤香， 高 虹

(1哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生微生物学教研室，黑龙江 哈尔滨 150081;2佳木斯大学基础医学院，黑龙江 佳木斯 154007;3广东药学院生物学教研室，广东 广州 510006)

腺病毒(adenovirus，ADV)是一群分布十分广泛的DNA病毒，可以感染呼吸道、肠道、眼睛、膀胱以及肝脏，引起人类呼吸道、胃肠道、泌尿系及眼的疾病并造成流行传播，少数对动物有致癌作用，严重威胁着人类的健康［1，2］。目前，腺病毒感染主要是药物治疗，至今仍缺乏特异性强、副作用小的药物。

肉桂醛是传统中药肉桂挥发油中的主要成分。近30年来的药理学研究证实，它具有抗菌［3－5］、抗肿瘤［6，7］、抗突变［8］和促进内皮细胞增殖［9］等多种药理作用，且毒副作用低。目前关于肉桂醛抗病毒作用方面的研究甚少［10］。

材料和方法

1 材料

1.1 主要试剂 肉桂醛、MTT和鼠抗腺病毒六邻体(hexon)蛋白特异性单克隆抗体购于Sigma;胎牛血清和RPMI－1640培养液购于Invitrogen;二甲基亚砜购于上海菲达有限公司;FITC标记山羊抗小鼠IgG抗体和多聚赖氨酸购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.2 细胞株和病毒株 HeLa细胞株和ADV病毒株由哈尔滨医科大学卫生微生物教研室保存。

2 方法

2.1 药物配制 用RPMI－1640培养液将肉桂醛(25 g/L)按1∶10、1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640和1∶1280 比例进行倍比稀释，0.22 μm微孔滤器抽滤除菌，4℃保存备用。

2.2 病毒培养液的制备及其毒力测定 取腺病毒液0.5 mL接种到已经培养成70%单层HeLa细胞的培养瓶中，37℃吸附120 min，加入含2%胎牛血清的RPMI－1640维持液1.5 mL，置37℃、5%CO2条件下培养，当HeLa细胞病变达75%以上时，反复冻融3次收集腺病毒液。以50%细胞培养感染量(50%cell culture infective dose，CCID50)表示病毒毒力。……