贾丹兵，刘 珊，李乃民，唐立明，李春杰，巩沅鑫

解放军第二一一医院，黑龙江哈尔滨 150080

参姜锁阳益气片是防治高寒缺氧的优效药品，其处方来源于我院主任医师师承经验方，具有深厚的临床基础。参姜锁阳益气片主要由西洋参、干姜、桂枝、寸冬、锁阳、红花、阿胶等成分组成，具有温阳祛寒，纳气平喘，益肺补肾，通经活络，调元散瘀之功效，可抗御寒冷环境中机体心、肺、肾、脑等重要器官缺氧、功能减退等，防止高寒缺氧性疲劳的发生。为了提高临床用药的安全性，本实验参照文献[1-4]，通过对小鼠灌胃给药，观察参姜锁阳益气片的急性毒性反应，为其临床应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

采用ICR小鼠（SPF级）40只，雌雄各半，体重18.8～21.9 g，平均年龄6周，动物由上海西普尔-必凯试验动物有限公司提供，实验动物质量合格证号2008001601736，生产许可证号 SCXK（沪）2008-0016，使用许可证号 SYXK（沪）2007-0003。 室内温度：23.2～24.0℃；湿度：43.2%～55.2%。

1.2 实验药物

参姜锁阳益气片，由解放军第二一一医院研制并提供，成人每日用量为2 g。药物溶于蒸馏水中，该药最大浓度为0.4 g/ml，保存温度为 4℃。

1.3 给药途径

采用口服灌胃给药，与推荐的临床用药途径一致。

1.4 实验方法

1.4.1 预试验 取体重18～22 g小鼠10只，雌雄各半，禁饲供水12 h，给予小鼠可承受的体积0.8 ml/20 g体重，药物最大浓度0.4 g/ml，一次性给予小鼠灌胃，给药后常规饲养，连续观察7 d，此期间发现小鼠生命状况良好，无死亡现象。因无法测出该药的LD50，故进行最大耐受量（MTD）的测定[4]。

1.4.2 最大耐受量（MTD）取清洁级ICR小鼠40只，雌雄各半，常规饲养3 d。按体重随机分成2组：给药组和溶媒对照组，每组20只，雌雄各半。实验前小鼠禁饲供水12～14 h，两次给药期间禁饲供水。给药组给药当日上、下午各给药1次，参姜锁阳益气片的最大给药浓度为0.4 g/ml，最大给药容积为50.0 ml/kg，单次给药剂量为20.0 g/kg，总给药量为40.0 g/kg；溶媒对照组给予同规格容积的去离子水。连续观察14 d，记录动物给药后的毒性反应及死亡情况。毒性反应重点观察症状、损伤程度、毒性反应起始时间、持续时间及恢复时间等。

1.5 统计学方法

采用SPSS 13.0统计较件进行分析，数据以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用 t检验，P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

两组动物给药观察14 d后，均未见明显异常。动物第1、7及14天体重均有所增加，且两组增长幅度相近。见表1。14 d后小鼠处死，经剖检肉眼观察未见异常。

表1 参姜锁阳益气片急性毒性实验动物体重的变化（±s,g）

表1 参姜锁阳益气片急性毒性实验动物体重的变化（±s,g）

组别 性别 体重服药前 给药后1 d给药后7 d给药后14 d给药组溶媒对照组♀♂♀♂19.73±0.5420.43±0.6619.75±0.5520.50±0.6420.74±1.0921.97±0.8721.62±0.8923.48±0.8424.23±0.8627.14±0.8925.15±1.9727.51±0.8327.95±1.3528.28±1.1128.38±2.0131.75±0.97

3 讨论

中医理论认为：肺为气之主，肾为气之根，寒为杀厉之气，在天为寒，在人脏为肾；寒则血泣，有所犯大寒，内致骨髓；寒胜者，当从温治。因此，本研究依据中医理论治疗高寒缺氧之疾，应首以温热药除去寒邪，再以补阳消阴、暖丹田、固真气、活血增元之药，合而治寒邪入脏，达增五脏之真气、蓄阳以御外寒、强身而固本之功效[5]。

本实验表明：①小鼠用参姜锁阳益气片灌胃后能正常饮食，精神状态良好，活动积极灵活，体重增加正常，没有出现死亡现象。第14 d小鼠处死后经剖检肉眼观察未见异常。②一般认为，按体重计算，小鼠1日内最大给药量相当于成人临床日用量的100倍以上是较为安全的。以最大浓度、最大体积给予ICR小鼠灌胃，均未出现动物死亡，测不出LD50。故做最大耐受量测试，1 d小鼠最大给药量为40 g/kg，相当于60 kg成人日用量的1200倍 （安全倍数=小鼠最大耐受量×成人平均体重/成人每日用量=40 g/kg×60 kg/2g=1200倍）。可见参姜锁阳益气片的急性毒性小，可作为一种安全的药物制剂应用于临床。

[1]袁伯俊,王治乔.新药临床前安全性评价与实践[M].北京:军事医学科学出版社,1997:23-42.

[2]国家食品药品监督管理局.中药、天然药物急性毒性研究指导原则[S].北京:中国医药科技出版社,2005:9.

[3]陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,2006:107-110.

[4]毛和平,刘光斌,刘效栓,等.和胃散急性毒性实验研究[J].中国医药导报,2009,6(6):22,34.

[5]卫生部药政管理局.中药新药研究指南[M].北京:人民卫生出版社,1993:203.