杨 澍，徐强胜，王雪刚，黄顺坤，彭秋燕，麦群弟，洪婉媚(深圳市第八(宝安)人民医院感染内科，深圳518101)

大肠埃希菌是临床常见的条件致病菌，也是医院感染常见病原菌[1]。随着抗菌药物的广泛使用，产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌不断增加，这给临床用药带来了困难。本研究对我院2008—2010年各科室送检标本进行回顾性分析，了解大肠埃希菌的耐药性及基因特征，为医院感染控制及临床合理用药提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源:2008—2010年3年里从本院各科室临床标本中分离的大肠埃希菌分别为292、342、356株。

1.1.2 细菌培养鉴定的主要仪器及试剂:采用MicroScan 40/96全自动微生物鉴定仪，及配套阴性复合板 NC21(美国Bering公司)，血平板、M-H平板、药敏纸片等。

1.2 方法

1.2.1 细菌分离鉴定:所有细菌分离培养根据《全国临床检验操作规程》推荐的程序进行，并采用MicroScan 40/96全自动微生物鉴定仪进行细菌鉴定及药敏试验确认。操作及结果判断参考美国临床实验室标准化研究所(clinical and laboratoy standard institute，CLSI/NCCLS)2004—2008 年标准。

1.2.2 药敏试验:(1)微量肉汤法:直接采用MicroScan 40/96全自动微生物鉴定仪检测氧氟沙星、氨苄西林、头孢唑林等12种抗菌药物的耐药性，药敏试验结果应用WHONET5软件进行统计。(2)质控菌株:大肠埃希菌ATCC 25922、铜绿假单胞菌ATCC 27853。

1.2.3 ESBLs确证试验:采用MicroScan 40/96全自动微生物鉴定仪检测ESBLs阳性并经双纸片法确认。按NCCLS判断标准，头孢噻肟和头孢他定中任何一种药物，加克拉维酸后抑菌环直径与相应不加克拉维酸抑菌环直径相比，增大≥5 mm时判定为ESBLs阳性。

1.2.4 基因检测的主要仪器及试剂:PCR仪器:AME基因扩增引物、Taq DNA 酶、dNTPs、MJ Option Monit 2.01，MJ Research，USA;自动成像系统:Bio-Rad，USA。……