张海凤，董亚琳，张 琰

(1.第四军医大学唐都医院药剂科，陕西 西安 710038; 2.西安交通大学医学院第一附属医院，陕西 西安 710061)

没食子酸(gallic acid)又名五倍子酸，化学名为3，4，5－三羟基苯甲酸，是自然界分布很广的一种有机酸，主要存在于茶叶、五倍子、塔拉、没食子等植物中，具有抗肿瘤、抗HBsAg/HBeAg和杀锥虫等作用[1]。其单体或低聚体可用来防治获得性免疫缺乏综合征，其甲基化衍生物是合成抗菌、抗心血管疾病、抗癌、镇静等药物的中间体。笔者的前期研究表明，中药五倍子的水提物具有α－葡萄糖苷酶抑制作用[2]，五倍子的主要水溶性成分之一为没食子酸。本研究旨在以麦芽糖为底物，采用两种模型研究没食子酸的α－葡萄糖苷酶抑制作用及其抑制类型，并利用Caco－2细胞模型研究其对葡萄糖吸收的抑制作用，初步探讨没食子酸的降血糖机制。

1 材料与方法

1.1 材料

CO2培养箱(日本YAMATO);医用超净工作台(苏州医疗器械仪器厂);Bio－RAD Model 550型全自动酶标仪(日本);倒置显微镜(日本 Olympuse);Waters－510型高效液相色谱仪(德国 Waters)。阿卡波糖(杭州中美华东制药有限公司，批号为060401);没食子酸(中国药品生物制品检定所，批号为0831－200302)，分别用磷酸盐缓冲液(pH=7.0)配制成10 mg/L的储备液，0.22 μm微孔滤膜过滤除菌待用;血糖试剂盒(上海科华东菱诊断用品有限公司，批号为20071121);麦芽糖(分析纯，汕头市光华化学厂，批号为051210)，用磷酸盐缓冲液溶解，过滤除菌，浓度为28 mmol/L;α－葡萄糖苷酶(EC3.2.1.20，东京 TLC 公司，批号为 MGI01)，用磷酸盐缓冲液溶解，过滤除菌，浓度为10 g/L。细胞Caco－2细胞来源于中科院上海细胞库。DMEM培养基(Gibco);胎牛血清(兰州民海生物制品公司);0.25%胰蛋白酶 (Sigma);5 g/L MTT溶液(Sigma);96孔培养板 (costar)。……