张燕玲，陈 超，杨 慧，薛小平

(1.西北工业大学生命学院，陕西 西安 710072;2.国家微检测系统工程技术研究中心，陕西 西安 710069)

微球技术的雏形最早可追溯到20世纪70年代，Horan等采用两种大小不同的微球在流式细胞仪上同时对两种抗体进行免疫分析[1]；McHugh等又用4种不同直径的微球同时检测血清中相应的HIV抗体[2]。随后研究发现，仅靠识别微球大小来检测，远远不能满足高通量和高灵敏度检测的需要。近年来，Luminex公司在微球合成过程中加入红色和橙色荧光染料，通过调节两种荧光染料的比例获得不同颜色的微球，即给每种颜色的微球一个地址，开发出荧光可寻址微球(Fluorescent addressable microsphere)，弥补了以往多元检测模式的不足[3]。在此基础上发展出的荧光微球技术(Fluorescent microsphere-based technology)是将聚苯乙烯羧基微球、荧光染料标记系统、激光技术、应用流体学及微球专用流式细胞仪等有机整合在一起的一项新技术，通过荧光微球信号来进行实验数据采集和分析，具有快速分析多重生物反应的特点及高灵敏度和特异性，可用于抗原抗体、核酸探针检测等领域的研究[4，5]。作者在此通过检测人免疫球蛋白G(IgG)和猪血红蛋白(Hb)与荧光微球的偶联效率，提示荧光微球技术可应用于免疫检测。

1 实验

1.1 材料和仪器

111#和172#聚苯乙烯荧光微球、荧光亲和素SA-PE，Luminex公司；人免疫球蛋白G(IgG)、生物素化羊抗人IgG(Biotin-羊抗人IgG)、猪血红蛋白(Hb)、兔抗猪血红蛋白多克隆抗体(Hb-PcAb)，北京鼎国生物技术有限责任公司；Biotin-NHS，CALBIOCHEM公司；碳二亚胺(EDC)，PIERCE公司。

Luminex-100TM荧光微球检测系统，Luminex公司；Millipore MultiScreen Assay System，Millipore公司；8543型紫外可见分光光度计，Agilent公司。……