邹 娟，叶蕊芳，郑 黎，吴 阳，张 立，戴 维

(1.华东理工大学 生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237；2.河南天方药业股份有限公司，河南 驻马店 463003)

螺旋霉素(Spiramycin，SPM)是螺旋链霉菌(Streptomycesspiramyceticus)发酵产生的次级代谢产物，属于十六元大环内酯类抗生素，主要抗革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、立克次氏体和大型病毒等，对于感染性疾病治疗具有临床应用和推广价值[1]。据文献报道，螺旋霉素的菌种选育采用过紫外线(UV)、Co60射线、NTG等诱变方法，均筛选出了高产菌株[2～4]。但是各种诱变方法的比较尚未见文献报道。

王筱兰[5]利用螺旋霉素的前体L-甲硫氨酸和L-缬氨酸类似物L-乙硫氨酸和L-α-氨基丁酸进行定向筛选，达到高通量筛选效果。螺旋霉素的十六元大环骨架是由乙酸、丙酸、丁酸等前体缩合而成，丙二酸钠可以作为它的一个3C前体结构类似物，乙酰胺可以作为一个2C前体结构类似物，两者可以用来高通量筛选螺旋链霉菌。

作者分别采用物理诱变、化学诱变、复合诱变处理同一出发菌株，比较各种处理手段对螺旋链霉菌的诱变效果以及对其稳定性的影响，找出最佳的螺旋链霉菌诱变手段，拟为深入研究螺旋链霉菌的诱变选育提供一定的理论指导。

1 实验

1.1 菌株

螺旋链霉菌25-1(出发菌株)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis，生物效价测定用)，河南天方药业股份有限公司。

1.2 培养基和培养条件

斜面和分离培养基(%)：淀粉4.0，黄豆饼粉2.0，玉米浆0.5，蛋白胨0.5，NaCl 0.2，CaCO30.5，琼脂粉2.0，pH值6.4，27℃倒置培养12 d，相对湿度30%～50%。

种子培养基(%)：淀粉 4.0，黄豆饼粉 2.0，玉米浆 0.5，蛋白胨 0.5，NaCl 0.2，CaCO30.5，pH值6.4，27℃、220 r·min-1下旋转摇床培养2 d。……