赵海滨，刘子旺，张秀静

（北京中医药大学第三附属医院，北京 100029）

肝气郁结证以情志忧郁、善太息、易怒、多疑善虑等情绪障碍为核心症状，是临床极为常见证型，可见于现代医学的内分泌、消化、神经、心血管等多个系统疾病中，但其病理实质未明，目前多数专家认为：肝气郁结证是在负性情绪心理应激状态下，以高级神经中枢调节机制紊乱为前提，多系统病理改变的有机概括[1]。其中，神经—内分泌系统的改变更具代表性，为了深入研究肝郁证形成的生物学基础，本研究利用慢性应激结合孤养方法建立了肝气郁结证大鼠模型。在此基础上对模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴相关激素进行检测分析，阐释“肝气郁结证”的物质基础。

1 材料和方法

1.1 实验动物 雄性清洁级Wistar大鼠20只，7周龄，体质量180～220 g，由军事医学科学院实验动物中心提供。

1.2 主要试剂及仪器 促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、血清皮质酮（CORT）酶联免疫吸附实验（ELISA）试剂盒（北京尚柏生物医学技术有限公司提供）。蔗糖（北京化学试剂有限公司提供），电子秤（厦门佰伦斯电子科技有限公司生产），自制开野实验敞箱。

1.3 动物分组及处理 适应性喂养1周，先通过开野实验将水平运动次数加垂直运动次数不足30次或超过120次的大鼠剔除，采用随机数字表法将合格大鼠20只按体质量随机分为两组：1）正常组10只，正常条件饲养28 d。2）模型组10只，孤养+慢性不可预知应激28 d。

1.4 动物模型制备 1只/笼，对大鼠施予如下刺激：禁水 24 h，40℃热烘 5 min，夹尾 3 min，倾斜鼠笼2 h+垫湿辅料 (湿度以倾斜后笼底能看见水为度)，行为固定 2 h（自制大鼠固定器），禁食 24 h，电击足底（电流强度1.0 mA，10秒/次，间隔1 min刺激1次，共30次）。……