刘永惠 郭少贤 常 靖 李 安 夏欣欣 王 瑞 华 莎

西安交通大学医学院第一附属医院(西安 710061)

乳腺癌的发生、发展、转移与突变型 P53基因和 mdm2基因关系密切,突变型 P53基因和 mdm2基因是肿瘤的相关基因。现代中医研究认为,肿瘤及其转移存在血瘀证,血瘀证与肿瘤增殖、转移存在正相关关系[1]。为深入研究血瘀证与活血化瘀药物抗癌的作用机理,本实验通过检测丹参酮干预血瘀证裸鼠 P53、mdm2的表达,探讨其抗肿瘤增殖、转移的作用机理。

1 材料与方法 1.1 实验动物与细胞系 雌性裸鼠 40只,5周龄,体重 (20± 1)g,来自上海斯莱克实验动物有限责任公司 ,许可证号码 SCXK(沪 2007-0005),实验和饲养均在 SPF条件下进行。乳腺癌细胞株 MDA-M B-231s购自北京康为世纪生物科技有限公司。

1.2 实验药物 丹参酮注射液购自西安交通大学医学院第一附属医院 (批号 90527CY)。肾上腺素购自上海禾丰制药有限公司(批号 H31021062)。

1.3 主要仪器与试剂 SCW-BCM生物超净工作台购自苏州市长春电子仪器厂,MDF-U72V超低温冰箱购自日本三洋公司,台式多功能离心机购自长沙市鑫奥仪器仪表有限公司,普通光学显微镜购自日本 Olympus公司,电热恒温水浴箱DR-HW-2购自北京西城区医疗器械厂,CO2细胞培养箱购自上海控菱科技有限公司,旋涡混合器购自上海第三分析仪器厂,胎牛血清购自杭州四季青生物工程材料有限公司,P53 Elisa试剂盒购自 Groundwork Biotechnology Diagnosticate分装,MdM 2 Elisa试剂盒购自 Groundwork Biotechnology Diagnosticate分装。

1.4 方 法 1.4.1 细胞培养:人乳腺癌细胞系 MDAM B-231s在 10%胎牛血清的培养基中,5%CO2、37℃条件下培养,待细胞长至瓶底 80～90%,用 0.25%胰蛋白酶消化,3～5d传代一次。……