李秀华

(三峡大学仁和医院，湖北 宜昌 443001)

卵巢早衰(POF)是指妇女在40岁以前的绝经，伴血清促性腺激素水平升高和雌激素(E2)水平下降，临床上伴有潮热多汗、情绪不稳、性欲低下等一系列绝经期表现，发生率约有1%～3%，严重影响着妇女的生活质量。本研究通过检测性激素及外周血T淋巴细胞亚群分布，了解POF患者内分泌的改变及免疫细胞亚群分布状态，探讨健脾补肾方对POF妇女内分泌及免疫系统的作用。

1 材料与方法

1.1 检测对象 选自2009年1月至2010年1月在我院妇科内分泌门诊就诊的 POF患者 30例，年龄 23～39〔平均(33.33±5.37)〕岁，符合POF诊断标准:40岁前卵巢功能衰竭，伴或不伴绝经期症状，所有病例继发闭经半年以上;无高催乳素血症，卵泡刺激素(FSH)＞40 IU/L或促黄体生成激素(LH)＞30 IU/L，雌激素(E2)＜25 pg/ml，即认为无卵泡发育，卵巢功能衰竭。另选择正常生育期妇女30例对照，两组妇女妇科检查子宫附件完整，排除其他器质性病变，检测前3个月无服药史。

1.2 仪器与试剂 流式细胞仪(FCM)由美国Beckman Coulter公司提供，型号为EPICS;磁性酶仪由瑞士Serono公司提供;荧光标记单克隆抗体试剂均来自于法国Immunotech公司。

1.3 试验方法 试验前，所有观察对象均禁食12 h以上，2 w内不吸烟、不饮酒，以上午8～10时抽取静脉血6 ml，2 h内分离血清，－20℃冰存，集中检测。①FCM检测并分析CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等相关免疫细胞学指标;②雌性匀相酶免法(HEI)检测60例妇女的血清中6项性激素:FSH、LH、E2、睾酮(T)、孕酮(P)、催乳激素(PRL)的水平;③试验组30例进行健脾补肾方治疗，健脾补肾方由:党参15 g，白术15 g，枸杞 15 g，白芍 15 g，山药 15 g，茯苓 10 g，陈皮 10 g，巴戟天10 g，菟丝子 10 g，柴胡 10 g，当归 10 g，熟地 10 g，紫河车 10 g，甘草10 g，此方以参苓白术散加减，主要从健脾补肾着手，用水煎服，1剂/d，共6个月。6个月后对患者再次采血进行上述指标检测。

1.4 统计学方法 应用SPSS11.5统计软件，数据用x±s表示，统计处理用方差分析(ANOVA)和t检验。

2 结果

2.1 两组性激素水平比较 POF患者，FSH、LH增加，E2、P下降(均P＜0.01)，PRL、T仍保持有一定的有效浓度。POF患者经过6个月的中药治疗，FSH、LH明显下降，E2、P明显增加，PRL、T无明显改变。见表1。POF患者经过6个月的中药治疗，FSH、LH 明显下降，E2、P 明显增加，PRL、T 无明显改变。

2.2 外周血T淋巴细胞亚群的比较 POF患者存在免疫异常，不仅与淋巴细胞的相对数目有关，还与其比例失衡有关。CD4+明显下降，CD8+明显增加，CD4+/CD8+下降。POF患者经过6个月的中药治疗，CD4+、CD4+/CD8+明显增加，免疫功能增强，以体液免疫增强为主。见表2。POF患者经过6个月的中药治疗，CD4+、CD4+/CD8+明显增加，免疫功能增强，以体液免疫增强为主。

表1 治疗前两组性激素水平比较(x ± s，n=30)

表2 治疗前两组外周血T淋巴细胞亚群的比较(x±s)

3 讨论

3.1 POF与免疫 POF，定义为40岁前由于卵巢内卵泡耗竭或医源性损伤导致卵巢功能衰竭。病因可因遗传因素、自身免疫性疾病、医源性损伤或特发性原因引起。以低E2及高促性腺激素水平为特征，表现为继发性闭经，常伴有围绝经期症状〔1〕，诊断以至少半年或以上闭经多次发生、排除其他原因为基础。

机体维持正常的免疫功能状态，有赖于各种免疫细胞，特别是各类T细胞亚群之间的相互协作或相互制约，以产生适度的免疫应答，使之既能清除异物抗原，又不致损伤机体自身组织。研究表明〔2〕免疫系统直接或间接地参与卵泡的发育与闭锁过程，影响卵巢的功能。T淋巴细胞占外周血淋巴细胞总数的60%左右，当感染、药物、理化等因素的作用打破抑制性T淋巴细胞(CD8+)与辅助性T淋巴细胞(CD4+)的生理平衡，则将导致自身免疫病。Chernyshov等〔3〕测定早期(闭经时间＜2年，没有典型闭经症状)POF患者外周血淋巴细胞，发现CD3+、CD9+、CD3+/CD8+淋巴细胞水平都下降，说明POF患者T细胞群可能会发生改变。POF患者外周血CD8+T细胞明显升高，CD4+/CD8+T细胞的比值下降，与血清E2水平相关，用健脾补肾方治疗后，外周血CD8+T细胞下降，CD4+/CD8+T细胞比值部分恢复。POF患者与正常妇女CD4+细胞亚群百分比比较，明显低下，同时CD8+细胞亚群明显增高。说明POF闭经的原因，并不单纯由年龄增长引起，可能有细胞免疫的变化，发生自身免疫性卵巢炎。而CD8+淋巴细胞亚群的升高，可能是卵巢功能衰退闭经时自身免疫性卵巢炎在外周血的反映。

3.2 组方分析 POF在中医学上属于月经过少，闭经，不孕等范畴。由于精神紧张，加上先天不足或后天调理失常，致肝肾不足、冲任为病，提前出现任脉虚，太冲脉衰少，天癸竭的病理现象，故形坏而无子〔4〕。POF的病机，主要为脾肾亏虚，故健脾、补肾并用是本症治疗大法，故自拟健脾补肾方。本方由参苓白术散加减而成，首先通过调理脾胃的功能，使脾胃之气健旺，水谷精微得以运化，资生气血，使正气得运，阴血得复。辅以巴戟天、菟丝子、紫河车等温养肝肾，调补冲任，收到补阴益精之功;另外女人平素多由情志所伤，七情郁结，肝失条达，生化之源不足，肝体失养，皆可使肝气横逆，因此加入柴胡疏肝解郁，白芍养血柔肝。中医认为肾为先天之本，脾为后天之本。全方既温养先天肾气以生精，又培补后天脾胃以生血，并佐以调和血脉之品，使精充血足，冲任得养，疾病得愈。

3.3 疗效与实验研究分析 在临床应用中，健脾补肾方在临床上有明显的疗效，患者潮热、烦躁等围绝经症状得到缓解或消失，月经恢复来潮。结合实验研究，分析其作用机制为:①免疫调节作用:本研究表明健脾补肾方可增强POF患者的免疫功能，促进机体清除“异物”，修复损伤的子宫内膜，通过益气，更好的改善气虚状态，健运中焦，生化气血，使五脏六腑得养，则机体各种病理状态得以调节、恢复，自身调节能力提高。②改善血液循环，调节凝血与纤溶系统的平衡:POF患者整体存在血瘀〔5〕，健脾补肾方可通过养血活血的而修复卵巢血管内皮损伤，加强血液流变性，促进凝血消散，增加卵巢血供，使卵巢的功能恢复。③对女性内分泌功能的整体调节作用:在治疗过程中，女性激素都发生了改变，不仅E2增加，而且FSH、LH也发生了变化，下丘脑-垂体-卵巢轴的整体调节功能发生了改变，使患者已早衰的卵巢恢复或部分恢复其排卵及内分泌功能。

1 乐 杰.妇产科学〔M〕.第7版.北京:人民卫生出版社，2008:310.

2 高 慧，杨 涓，夏 天，等.补肾调冲方对卵巢早衰大鼠卵巢相关细胞因子TNF-α、IFN-γ蛋白和基因表达的影响〔J〕.国医论坛，2008;23(3):32-40.

3 Chernyshov VP，Radysh TV，Gura IV，et al.Immune disorders in women with premature ovarian failure in initial period〔J〕.Am J Reprod Immunol，2001;46(3):220-5.

4 杜嫦燕，柴洪佳，邹志洁.补肾养肝汤治疗卵巢早衰40例临床观察〔J〕.新中医，2009;41(10):49-50.

5 董 莉，姜 琳，林晓倩，等.补肾活血方对早衰患者血清FSH、LH、E2及PRL的影响〔J〕.上海中医药杂志，2007;41(11):48-9.