李 超，陈元坤，吴学渊，杨海涵

（四川省新兽药工程技术研究中心，四川 成都 611130）

植物血凝素（PHA）是一种从豆科植物中提取的有丝分裂原，作为一种低聚糖与蛋白质的复合物，植物血凝素有促进淋巴细胞有丝分裂、激活免疫细胞的作用。本试验研究了植物血凝素对仔猪免疫功能方面的影响，以进一步证实其免疫增强功能。

1 试验材料

1.1 试验动物 品种相同、体重相近的未进行猪瘟疫苗免疫的35日龄仔猪60头，由成都乾坤动物药业有限公司实验猪场提供。

1.2 试验药品及试剂 猪瘟兔化弱毒疫苗（批号110205，大北农公司），猪瘟病毒IgG抗体检测试剂盒（批号2011.4.01，深圳绿诗源生物技术有限公司），动物淋巴细胞分离液SC1083（批号2011.1.12，北京五洲元业科贸公司）；α-醋酸萘酯、甲基绿、品红、亚硝酸钠（北京索莱宝科技有限公司）；鸡子豆购自超市。

1.3 试验仪器 JJ-2型高速组织捣碎匀浆机，XFB-200小型高速粉碎机，IMark 10608型酶标仪，显微镜，离心机等。

2 试验方法

2.1 植物血凝素（PHA）的制备 称取鸡子豆适量，粉碎，加入适量蒸馏水4℃冰箱放置，吸胀24 h，在高速组织捣碎匀浆机内12000 r/min匀浆2次，每次5min，置4℃冰箱抽提24h。再用纱布过滤，滤渣弃掉，滤液以4800 r/min离心20min，收集上清液，进行活性测定。

活性测定采用红细胞凝集实验。通过翅静脉采集新鲜公鸡血，用3.8%枸橼酸钠抗凝，3 000 r/min离心15min，去上清，收集沉淀的红细胞，再用生理盐水洗涤3次，最后用生理盐水配成1%～2%红细胞悬液。将PHA倍比稀释成21～210等梯度，结果以使红细胞凝集50%以上的PHA的最大稀释倍数为血凝效价。测定血凝效价后加入适量甘露醇、蔗糖进行真空冷冻，干燥，然后称重，计算PHA冻干粉的重量。……