伍光超

广西古方药业有限公司，广西 南宁 530221

复方健肾酒由淫羊藿，肉苁蓉，金樱子，枸杞子等中药组成，具有补肾助阳作用。适用于肾阳不足所致的腰膝冷痛，头晕耳鸣，气短乏力，精神不振，夜尿频多。方剂中淫羊藿的主要成分为淫羊藿苷［1］。本研究建立了淫羊藿苷的含量测定方法，旨在为该药酒的质量标准制定提供实验依据。

1 仪器和材料

1.1 仪器

岛津LC－10A高效液相色谱仪;威玛龙色谱工作站;岛津UV－2450紫外分光光度仪;梅特勒－托利多AB265－S型分析天平;SYZ－A石英亚沸高纯水蒸馏器 (江苏信达仪器厂)。

1.2 材料

乙腈 (天津四友生物医学技术有限公司色谱纯)，淫羊藿苷 (中国药品生物制品检定所，批号:110737－200312，含量测定用)，复方健肾酒 (本公司自制，批号为:090301、090302、090303)及淫羊藿的阴性样品。

2 方法和结果

2.1 色谱条件

色谱柱为岛津 VP－ODS C18柱 (5?m，4.6mm X 150mm);流动相为乙腈－0.1%磷酸水溶液 (25∶75)，检测波长为270nm［2］。流速1.0ml/min;柱温:室温。理论板数按淫羊藿苷不低于6000，此条件下淫羊藿苷与其他成分分离度不低于1.5。

2.2 溶液的配置

2.2.1 对照品溶液的配置 精密称取淫羊藿苷对照品适量，加甲醇配制成每1ml含30μg的溶液，即得。

2.2.2 样品溶液的制备 取内容物2ml，置10ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。

2.2.3 阴性样品溶液的制备 按处方比例，以样品生产方法制备淫羊藿的复方健肾酒，照样品溶液方法制备阴性供试液。

2.3 测定方法

分别精密吸取对照品溶液、样品溶液、阴性样品溶液各20μl，注入高效液相色谱仪，按确定的色谱条件测定，淫羊藿苷与其他成分分离良好，阴性无干扰，如图1～3。

2.4 线性关系的考察

精密称取淫羊藿苷对照品10.20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取对照品溶液1，2，3，4，6ml分别置10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。按上述色谱条件，分别进样20μl，测定，结果以进样量为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，经回归方程处理，方程为 Y=－11098+2256987x，r=0.9997。可见，淫羊藿苷在0.2040～1.2240μg范围内，线性关系良好。

图1 淫羊藿苷对照品色谱图

图2 复方健肾酒样品色谱图

图3 复方健肾酒阴性样品色谱图

2.5 仪器精密度实验

精密吸取同一样品溶液20μl，按上述色谱条件，连续进样6次，测定色谱峰面积，计算RSD值为0.7%，表明仪器精密度良好。

2.6 样品溶液稳定性实验考察

精密吸取同一批样品溶液 (批号:090201)20μl，按样品溶液制备方法制备样品溶液，在2，4，6，8，24，48，72h时间间隔进行分析，测定色谱峰面积，计算RSD值为0.55%，表明样品溶液制备后72h内稳定。

2.7 重复性实验

取同一批号样品 (批号:090201)6份，按样品溶液制备方法制备样品溶液，测定含量进行分析，结果平均含量为0.1304mg/ml，RSD为2.13%，表明本测定方法重复性好。

2.8 加样回收率实验考察

取已知准确含量 (0.1304mg/ml)的样品6分，每份取1ml，置10ml量瓶中，精密加入1ml淫羊藿苷对照品溶液(0.1224mg/ml)，加按样品溶液制备方法制备，分别注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件下测定淫羊藿苷峰面积，计算回收率，结果见表1。表明，本方法回收率良好。

表1 回收率实验考察结果

2.9 样品的含量测定

另取不同批号的复方健肾酒3批，按上述方法测定，结果见表2。

表2 不同批号的复方健肾酒含量测定结果

3 总结

复方健肾酒方中含药味较多，其质量控制存在困难，淫羊藿为方中主药，测定其主要成分淫羊藿苷含量，对控制本品质量，更好地保证临床疗效具有重要意义。为此，本研究以淫羊藿苷的含量作为测定指标，建立方法。总之，结果表明，HPLC测定复方健肾酒中淫羊藿苷含量的方法具有简便，准确，重复性好等优点。

［1］单娜，路金才，王晶.朝鲜淫羊藿的研究状况［J］.中南药学，2008，6(6):722－726.

［2］国家药典委员会.中国药典.I部［S］.北京:化学工业出版社，2005:1.