程建国 宋艳红 王仲琴 徐 景 赵晶晶

盐酸林可霉素又称盐酸洁霉素，主要用于治疗革兰氏阳性菌和支原体感染。对葡萄球菌、溶血性链球菌作用较强，对厌氧菌如破伤风梭菌、产气荚膜芽孢杆菌有抑制作用，对猪痢疾密螺旋体和弓形虫也有一定作用。用作饲料添加剂时，可促进肉鸡和育肥猪的生长，提高饲料利用率。因此，盐酸林可霉素常被加在育肥猪和肉鸡饲料添加剂中，为了更好地控制饲料添加剂的质量，我们对高效液相色谱法测定饲料中盐酸林可霉素含量的方法进行了研究。

1 仪器与试药

WATERS2695高效液相色谱仪（包括四元泵，DAD 检测器，柱温箱，10 μl自动进样器）；KQ－100超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司生产）；Thermo sorvall型离心机；Sartorius BP210S型电子天平。

盐酸林可霉素对照品 (中国兽医药品监察所生产，批号：K0101003，含量 84.9%)，甲醇为色谱纯，其它试剂为分析纯。供试品为育肥猪饲料添加剂，添加量为5%。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备

精密称取盐酸林可霉素对照品0.05892 g(含盐酸林可霉素0.05002 g)，置100 ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，制成每1 ml中含0.5002 mg的溶液，作为对照品溶液。

2.2 供试品溶液的制备

称取供试品5.0 g 7份，分别置25 ml离心管中，精密称取对照品，①0.26 mg、②2.61 mg、③4.72 mg、④6.25 mg、⑤7.76 mg、⑥8.69 mg、⑦0 mg 分别添加入①～⑦号供试品中，编号一一对应，其中⑦号供试品作为空白样品，取上述供试品，分别精密加入甲醇15 ml，使供试品湿润，轻轻摇匀，超声20 min，5000转离心5 min，取上清液用0.45 μm滤膜过滤后，作为供试品溶液。

2.3 色谱条件

Inertsil ODS－3 色谱柱(150 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相[1]：0.05 mol/l硼砂溶液： 甲醇（55： 45）；流速：1.0 ml/min；检测波长[2]：214 nm；柱温：25 ℃；进样量10 μl，出峰时间快，峰形比较好，按上述条件检测对照品溶液结果如图1，空白样品结果如图2，供试品溶液结果如图3。……