邢国宏，孔立新，景洪标

肺气肿动物模型在肺气肿发病机制研究中具有特别重要的意义，建立标准化符合临床实际的肺气肿动物模型也一直是国内外学者探索的课题。木瓜蛋白酶及猪胰弹性蛋白酶等酶类气管内滴入是肺气肿动物模型制作的主要方法，近年也有基因修饰造成的肺气肿模型[1]。但这些动物模型与人类由长期吸烟慢性刺激引起的肺气肿病理变化不完全一致。为更贴近临床实际的肺气肿研究，笔者建立了香烟烟雾刺激诱发的小鼠肺气肿模型。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物与分组 鼠龄为12周的雄性C57BL6小鼠（中国医学科学院实验动物中心提供）36 只，体重（21.2±1.9） g。 随机分为 3 组，每组 12只，分别是A组 （吸烟90 d组）、B组 （吸烟180 d组）和C组（对照组）。

1.2 染毒方法 将小鼠置于自制的有机玻璃染毒箱内，80 cm×60 cm×58 cm，箱顶留有直径1.5 cm的通气孔，箱内放置钠石灰吸收二氧化碳，以无水氯化钙吸收水蒸汽。金健牌纸烟（北京卷烟厂，焦油含量14 mg）点燃后置染毒箱内，5支/次，持续30 min/次，2次/d，两次吸烟间隔4 h，吸烟之外的时间正常饲养。A组小鼠连续吸烟90 d，B组连续吸烟180 d。C组不吸烟常规饲养180 d。吸烟组小鼠于吸烟完成后当日，对照组小鼠于饲养第180天摘眼球放血处死。开胸游离心肺，气管插管并固定气管插管后，完整取出心肺组织。

1.3 支气管肺泡灌洗液（BALF）制备和细胞计数分类 经气管插管行双肺支气管肺泡灌洗（BAL）。用生理盐水0.8 ml/次分次经气管插管缓慢灌洗，连续5次，回收率均>70%。将所得BALF离心（1 500 r/min离心10 min），留取上清液他用，离心细胞沉淀用Hank’s液冲洗、离心3次，最后调整溶液为1 ml，在白细胞计数板上光镜下计数BALF中的炎症细胞总数，并制成细胞涂片，瑞氏染色后做分类计数。