程相铎，雍 磊，梅海豫，李 波

嗜酸性粒细胞阳离子蛋白 （eosinophil cationic protein，ECP）是活化的嗜酸性粒细胞释放的毒性蛋白，在支气管哮喘的发生、发展中起重要作用，可作为评价哮喘疗效的指标。为探索变应原快速特异性免疫治疗 （fast specific immunotherapy FSIT）的机制，笔者对60例支气管哮喘患者进行了快速特异性免疫治疗，测定了治疗前后血清ECP的变化，并与60例对照组进行对比观察，结果如下。

1 对象与方法

1.1 对象 选择符合支气管哮喘诊断标准[1]，并经过变应原特异性IgE测定确诊的支气管哮喘120例；男54例，女66例；年龄平均（35.7±9.5）岁。随机分为治疗组60例，男28例，女 32 例，年龄平均（36.8±9.4）岁，病程平均（8.5±1.8）年；对照组 60 例，男 26 例，女 34 例，年龄平均（34.6±9.7）岁，病程平均（7.8±1.3）年。 两组间年龄、病程均无统计学差异（P>0.05）。

1.2 药物 北京新华联药业公司生产的变应原浸液，均为一种变应原原液配制成各浓度级，浓度分别为1∶105（W/V）、1∶104、1∶103、1∶102。

1.3 方法 治疗组： 初始治疗变应原浸液浓度从1∶105（W/V）开始，以 0.1、0.2、0.4、0.8 ml剂量递增，上午及下午各 1 次皮下注射， 尔后以 1∶104、1∶103、1∶102浓度递增，8 d 即可达维持量，完成初始治疗；从第9天开始进行维持治疗，用1∶102浓度0.5 ml皮下注射1次/周，1年后疗程结束[2]。对照组依据病情严重程度给予布地奈德气雾剂雾化吸入，疗程与治疗组相同。

1.4 血清ECP检测

1.4.1 标本采集 所有受检患者2周内未应用皮质类固醇激素，停用抗组胺药3 d（息斯敏停药1周），每位患者治疗前和治疗后1周各抽取静脉血2.5 ml，置普通玻璃管中，在37℃下凝血 60 min，1 000～1 350 g离心分离血清，-20℃冰箱保存备用。

1.4.2 仪器、试剂 Pharmasia Unicap100 System及ECP测定试剂盒，包括：β-半乳糖苷酶标记抗ECP抗体、抗ECP包被的固相载体（CAP）、底物（4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖苷）、ECP标准品、质控品等均为瑞典Pharmasia公司生产。

1.4.3 测定方法及原理 包被的ECP抗体与血清中的ECP结合，经洗涤后，加入荧光底物，在β-半乳糖苷酶作用下，产生荧光，仪器动态检测荧光强度，根据标准曲线，自动计算并报告血清标本ECP浓度（μg/L）。

1.5 统计学方法 分别对两组患者治疗前后血清ECP值求出均数和标准差（±s），采用t检验进行统计学分析。

2 结 果

血清ECP测定结果显示：治疗组与对照组治疗前患者血清ECP值水平无显著性差异（P＞0.05）。疗程结束后两组患者血清ECP水平具有显著统计学差异（P<0.01）。见表1。

表1 两组支气管哮喘患者治疗前后血清 ECP 水平（μg/L，±s）

表1 两组支气管哮喘患者治疗前后血清 ECP 水平（μg/L，±s）

治疗组 对照组 t P治疗前 24.34±5.12 25.16±5.79 0.82 ＞0.05治疗后 15.68±3.28 18.27±4.62 3.54 ＜0.01 t 11.03 7.20 P ＜0.01 ＜0.05

3 讨 论

支气管哮喘是一种特殊的病理免疫反应过程。当机体通过吸入、食入、注入或接触等各种途径，接受某种变应原后出现哮喘发作等强烈的变态反应。随着对支气管哮喘发病机制的深入研究及免疫治疗机制的进一步了解，对哮喘治疗侧重于病因治疗。特异性免疫治疗（specific immunotherapy，SIT）是目前唯一的变态反应性疾病病因治疗方法，是指给变应患者以递增剂量的变应原提取物，改善变应原引起的相应症状，包括常规免疫治疗和快速免疫治疗等，其中快速免疫治疗则是在剂量上升阶段，缩短注射间隔时间，尽快递增到维持剂量的一种脱敏治疗方法，可以缩短初始阶段治疗时间，从而缩短疗程，增加患者依从性。嗜酸粒细胞的浸润和气道高反应性是支气管哮喘的两个重要特征，嗜酸粒细胞和支气管哮喘的密切关系已得到公认，许多的证据已说明嗜酸粒细胞是变应性疾病中最活跃的细胞之一，速发型变应性疾病的组织和器官的局部以及渗出液中均有大量的嗜酸粒细胞出现。ECP是活化的嗜酸性粒细胞释放的一种单链、含锌、强碱性糖蛋白，可引起肥大细胞释放组胺，并具有极强的细胞毒性、神经毒性和杀菌、杀蠕虫作用，在凝血过程中与蛋白质相互作用及纤维蛋白溶解作用[3]。一项对变应性鼻炎、哮喘患者血清嗜酸性粒细胞阳离子蛋白水平的Meta分析结果显示，哮喘患者血清ECP比正常人升高，急性发作期变应性哮喘患者ECP水平明显高于缓解期患者，认为ECP水平高低与变应性哮喘病程及严重程度相关，血清ECP水平可作为变应性哮喘的一项实验室诊断指标[4]。本研究对60例支气管哮喘患者在快速特异性免疫治疗前后血清ECP检测，同时测定对照组60例支气管哮喘患者给予布地奈德气雾剂雾化吸入治疗前后血清ECP值。两组治疗后血清ECP值均低于治疗前，有显著性差异，其中治疗组血清ECP值明显降低，与对照组治疗后的血清ECP值相比有显著性差异。本研究表明快速特异性免疫治疗可有效抑制嗜酸性粒细胞聚集或释放ECP，从而起到治疗哮喘的作用。

[1]中华医学会呼吸病学分会哮喘学组.支气管哮喘防治指南（支气管哮喘的定义、诊断、治疗机教育和管理方案）[J].中华结核和呼吸杂志，2003，26（3）：132-138.

[2]梅海豫，程相铎，胡光荣.快速脱敏疗法对真菌致敏性哮喘的疗效及 IgE，ECP 的影响[J].临床军医杂志，2004，32(6)：17-19.

[3]高 静，林东红.嗜酸性粒细胞阳离子蛋白在支气管哮喘发病中的意义[J].医学综述，2005，11（3）：204-205.

[4]程 靖，林文盛，吴小海.变应性鼻炎、哮喘患者血清嗜酸性粒细胞阳离子蛋白水平的 Meta分析[J].循证医学，2009，9（3）：158-160，167.