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隐孢子虫P23基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

2011-06-08张国恩米荣升苏庆美胡义彬秦培兰呼高伟陈兆国

中国动物传染病学报 2011年2期
关键词:血清检测

张国恩,米荣升,苏庆美,黄 燕,周 鹏,胡义彬,秦培兰,呼高伟,陈兆国

(中国农业科学院上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室 中国农业科学院动物源性食品安全研究中心,上海 200241)

隐孢子虫病(cryptosporidiosis)是由食源性寄生原虫隐孢子虫(Cryptosporidium spp.)感染胃和肠粘膜上皮细胞引起的人兽共患寄生虫病,主要导致人和动物的自限性水样腹泻,还会引起患者慢性狭窄性小肠结肠炎(Crohn's disease)[1],对于免疫功能低下的病人特别是艾滋病(AIDS)患者会造成长期感染甚至会有生命危险。隐孢子虫之所以对人和动物造成重大危害,其原因主要有:常规消毒剂均无法完全灭活隐孢子虫卵囊;感染剂量低,一个卵囊就可能造成感染;对免疫功能低下的人和动物具有致死性;该病为人兽共患病,不仅影响人类健康,还对畜牧业的发展造成很大的危害[2]。隐孢子虫病日益受到国内外学者的重视,但至今尚无治疗或免疫预防隐孢子虫感染的有效方法[3]。目前主要通过加强管理和卫生措施、隔离患病动物,来减少疾病的传播。因此,对本病的准确诊断显得极其重要。

对隐孢子虫病的常规诊断技术是基于粪便镜检的病原学检测方法。该方法对实验条件要求简单,但检出率不高,很容易错检、漏检[4]。近年来出现的诸多分子生物学检测技术,如PCR、nested PCR、PCR-RFLP、RT-PCR和q-PCR,虽然敏感性很高、特异性也很强,但技术难度大,实验条件高,且费用较高,只能在科研单位和实验室条件下开展检测,难以在养殖现场推广应用[5-7]。……

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