詹 媛，陈鸿军，仇旭升，孙英杰，于圣青，丁 铲

（中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241）

新城疫（newcastle disease，ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus, NDV）引起的急性、高度接触性的人畜共患病，主要侵害禽类，被OIE列为List A疾病。自1926年ND首次爆发以来，世界范围内大流行已有3次[1]。ND在中国已存在几十年，至今仍然是家禽的主要疫病之一。NDV的基因组由单股负链RNA构成，基因组按照3'-NP-P-M-F-HN-L-5'的顺序编码6种病毒结构蛋白。

近年来，逐步有研究发现p38MAPK、PKA以及Akt等磷酸化通路在病毒感染的过程中发挥了重要的作用。腺病毒可通过PKA和PI3K信号途径对内皮细胞中连接蛋白40和43的表达进行调节。最新研究表明，在流感病毒感染过程中，宿主通过对蛋白磷酸化水平的调节进而调节病毒蛋白表达和病毒的大量增殖[2]。而在与NDV同属于副黏病毒属的水泡性口炎病毒（Vesicular stomatitis virus，VSV）、呼吸道合胞体病毒（Respiratory syncytia virus，RSV）和麻疹病毒（Measles virus，MeV）中也已经发现细胞内的CK-II和PKC等磷酸化激酶参与了病毒的感染过程[3]。关于磷酸化通路是否参与了NDV的感染过程目前尚无报道。本研究利用蛋白磷酸激酶抑制剂和激活剂研究磷酸化通路在NDV感染中的作用，试图为NDV复制机理和抗病毒药物的研究提供新的思路。

1 材料与方法

1.1 毒株和细胞 本试验所用病毒毒株为NDV标准强毒 Herts/33，由扬州大学刘秀梵院士惠赠；鸡0系成纤维细胞细胞系（DF1）由本研究室保存；细胞采用含10%胎牛血清的DMEM 培养液，常规37 ℃、5%CO2 培养箱中传代培养。

1.2 化学试剂 4',6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI），SB203580、H-89、staurosporine 和PMA购自Sigma公司；其他生化试剂均为分析纯，购自生工生物工程（上海）有限公司产品。……