南昌地区献血者血液内毒素含量调查
2011-06-07苗燕平何华庆
苗燕平,王 健,韩 玲,何华庆
(江西省血液中心,江西 南昌 330077)
输血安全、有效是采供血机质量目标的重点[1-2],细菌污染是影响血液质量最常见因素之一,而且主要是由于革兰阴性细菌感染,革兰阴性细菌可产生内毒素,为此,本中心采用动态浊度法检测南昌地区无偿献血人群血液内毒素,现将调查报告如下。
1 材料与方法
1.1 样本来源 从采集的血液中分离的血浆标本共326人份标本,自愿献血者符合国家献血健康要求的年龄l8~55岁,其中男性172人份、女性154人份,血型A、B、O和AB分别为96人份、90人份、109人份和31人份。
1.2 试剂和仪器 EKT-1M动态内毒素检测试剂盒 (批号:EKT-107, 灵敏度0.05EU/ml,北京金山川);细菌内毒素检查用水(批号200910);标准内毒素(批号 20090525,4EU/支,北京金山川); MB-80微生物快速动态检测系统、T01智能恒温仪、冰浴槽均由北京金山川科技发展有限公司提供。
1.3 实验方法
1.3.1 血浆制备 血液采集与血液保存液抗凝剂(枸橼酸盐)充分混均后,取血袋导管离心,选择淡黄澄清的正常血浆(去除脂肪、溶血等异常血浆)并热合使用,血浆样本直接检测或-25℃冰冻保存待检;实验使用玻璃试管、吸头均不含有外源性内毒素。
1.3.2 待测样品制备 取上述血浆0.10ml,加入装有0.90ml样品处理液中,混匀后置70℃保温10min,取出后放入冷水浴中冷却至37℃以下即为待测血浆样品。
1.3.3 样本检测 取待测血浆样品0.20ml加入反应主剂中,溶解后使用微量加样器转移至9mm×65mm无热原平底反应管中,插入MB-80微生物动态检测系统中进行反应,反应结束后由标准曲线自动计算出待测血浆中内毒素含量。……
