王 维,郑胜生,祁 瑶,闻惠琴,刘丽丽,沈继龙

IL-13细胞因子主要由活化 Th2细胞分泌[1],其功能具有多效性,IL-13表达异常与抗感染、肿瘤生长、哮喘发作、炎性损伤及组织修复等密切相关。作为Th2优势应答重要调节因子,IL-13已成为哮喘、特发性肺纤维化、溃疡性结肠炎等疾病重要治疗靶标。IL-13有亲合力和功能截然不同的二种受体:IL-13Rα 1和IL-13Rα 2,后二者氨基酸序列37%同源性。单独 IL-13Rα 1呈IL-13低亲合力;当 IL-13Rα 1与IL-4α结合形成异二聚体,则形成高亲合力的功能受体,促使IL-13发挥生物学效应[2]。相反,IL-13Rα 2与 IL-13的结合能力是 IL-13Rα 1的50倍,由于胞浆区仅含17个氨基酸,无结合JAK/STAT模序,不能启动IL-13-STAT6纤维化信号通路,从而行使“诱骗”IL-13作用,故 IL-13Rα 2又称“诱骗受体(decoy receptor)”[3-4]。

近年有关IL-13Rα 2在曼氏血吸虫病、哮喘等Th2免疫相关疾病中的作用已引起广泛关注。Mentink等报道曼氏血吸虫感染机体(患者和模型动物)血清IL-13Rα 2蛋白水平升高,且与肉芽肿体积相一致,IL-13Rα 2具有下调血吸虫病肉芽肿炎症反应,延长感染鼠寿命等作用[5]。鉴于Th2细胞因子必须通过细胞膜上受体传递信号级连,而关于血吸虫病IL-13Rα 2的细胞起源尚不清楚,本研究以感染日本血吸虫BALB/c鼠为模型,利用免疫荧光染色技术,检测肝肉芽肿和原代巨噬细胞IL-13Rα 2蛋白的表达情况,为进一步探讨血吸虫病等Th2型免疫疾病分子病理机制奠定基础。

1 材料和方法

1.1 实验动物与钉螺 5～6周龄BALB/c鼠购自中国科技大学实验动物中心。阳性钉螺购自无锡江苏省血吸虫病防治研究所。

1.2 主要试剂与仪器 胎牛血清(HyClone)、RPMI1640(Gibco)、多克隆羊抗鼠 IL-13Rα 2 IgG(R&D)、鼠抗CD68单克隆抗体……