郑将臣，万全，程起群，赵金良

(1.中国水产科学研究院东海水产研究所，农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室，上海200090;2.安徽农业大学动物科技学院，安徽合肥230036;3.上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室，上海201306)

全世界现有龟鳖类动物约14科、324种［1］。目前，国外关于龟鳖目分子系统学的研究较多［2－10］，国内对这方面的研究相对较少，且大多数是基于龟鳖类线粒体的研究［11－15］，而用核基因来分析龟鳖类系统进化的研究鲜见报道。RAG2是重组激活基因 (Recombination activatinggenes，RAGs)的一种。RAGs在脊椎动物中普遍存在，在进化过程中非常保守，不同物种之间其碱基组成变化很少，近年来被较多地运用于物种进化和亲缘关系的分析［16－20］。RNA 指纹蛋白 35(RNA fingerprint protein 35，R35)也是一种核内基因，目前关于这个蛋白的功能尚不明确，但是RNA指纹蛋白35基因被认为是单拷贝基因［21］，因此，国外已有若干学者运用RNA指纹蛋白35基因作为标记来研究龟鳖类动物的系统进化［7，22］。

本研究中，作者测定了两种龟的R35内含子序列和6种龟的RAG2部分序列，并结合NCBI上其它龟鳖类的相关序列，以此来初步探讨龟鳖类的系统进化特征。

1 材料与方法

1.1 材料

在安徽省长江水生动物保护中心采集6种龟的样品，每种龟各取1只个体的肌肉组织保存于冰箱(－20℃)中备用。龟鳖类分类地位均依据国际龟类动物分类工作组2009年修订的最新分类系统［1］。

1.2 方法

1.2.1 基因组DNA提取、PCR扩增和测序 基因组DNA采用标准的酚/氯仿法提取［23］，略作修改。R35基因扩增采用引物R35EX1和R35EX2［22］，序……