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凡纳滨对虾内质网膜转运通道蛋白基因Sec61γ的克隆及表达分析

2011-06-06熊建华盛小伟高永华李文兰杨彦豪陈晓汉

大连海洋大学学报 2011年5期

熊建华,盛小伟、,高永华、,李文兰,杨彦豪,陈晓汉

(1.广西水产研究所遗传育种与健康养殖重点实验室,广西南宁530021;2.桂林理工大学化学与生物工程学院,广西桂林541000)

Sec61γ基因编码是内质网膜转运通道蛋白Sec61的一种亚基[1]。在真核生物中,Sec61是一种位于内质网上的跨膜复合体,是转运功能蛋白的运输通道[2],其主要功能是形成一个疏水通道。在新生肽链的共翻译转运过程中,由于新生肽链的N端带有正电荷,不能轻易易位进入疏水的内质网膜,要完成蛋白质的转运,必然要形成一个蛋白引导通道,让核糖体合成的新生多肽通过并穿过内质网的内腔[3-4]。通道的形成涉及Sec61复合体与核糖体、内质网膜蛋白三者的相互作用[5]。目前,关于Sec61通道主要基因的研究主要集中在微生物[6]、果蝇[7]和哺乳动物[8]。对于 Sec61γ 基因的认识仅限于其作为Sec61通道一个亚基,其单独的功能研究鲜见报道。本研究中,作者在构建的凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei生长性状差减cDNA文库中筛选并克隆得到凡纳滨对虾Sec61γ基因氨基酸序列,研究了其在不同组织和不同生长期肌肉中的表达模式,旨在为进一步弄清该基因复合物的结构与功能的关系以及在凡纳滨对虾生长和发育中的作用提供参考资料。

1 材料与方法

1.1 材料

实验用凡纳滨对虾取自国家级广西水产研究所南美白对虾良种场。选择一个生长性状分离的对虾家系,在水族箱中暂养7 d,充气,使其适应实验室内养殖环境。实验用海水是用盐卤配制的,盐度为28,水温为28℃。……

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