国内5种猪圆环病毒PCV2抗体检测试剂盒的比较试验
2011-05-29吴华伟高金源郎洪武陈晓春
吴华伟,高金源,邓 永,范 鹃,郎洪武,陈晓春
(1.中国兽医药品监察所,北京 100081;2.扬州优邦生物制药有限公司,江苏扬州 225008)
猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2),属于圆环病毒科(Circoviridae)圆环病毒属的成员,是目前发现的最小的动物病毒。自20世纪90年代发现该病毒以来,PCV2病毒在世界各国迅速蔓延。我国于2000年检测到了该病毒的存在[1]。PCV2抗体检测对于进行PCV2流行病学调查、疫苗效果评价及试验用阴性猪的筛选等具有重要意义。目前,PCV2抗体检测的常用方法有病毒中和试验(SN)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫过氧化物酶单层细胞试验法(IPMA)。鉴于SN方法费时耗力,且PCV2病毒在细胞上很难出现细胞病变,常需借助免疫荧光试验(FA或IFA)进行结果判定。因此常用ELISA或IPMA方法进行PCV2抗体检测。国内已有商品化的猪圆环病毒PCV2抗体检测试剂盒出售[2-3]。为了解目前国内PCV2灭活疫苗效力检验用PCV2抗体检测试剂盒的质量,本试验选取国内5个厂家生产的5种PCV2抗体检测试剂盒(其中4种为ELISA方法,1种为IP-MA方法),分别对其进行敏感性、特异性和符合率测定,为实际应用提供了一定的依据。
1 材料
1.1 试剂盒 猪圆环病毒PCVII型抗体检测试剂盒(荷兰CEDI),批号为170408;猪圆环病毒PCV2 ELISA抗体检测试剂盒(A企业),批号为081103;猪圆环病毒PCV2 ELISA抗体检测试剂盒(B企业),批号为100805;猪圆环病毒PCV2 ELISA抗体检测试剂盒(C企业),批号为100807;猪圆环病毒PCV2 ELISA抗体检测试剂盒(D企业),批号为20101101;猪圆环病毒PCV2抗体IPMA检测试剂盒(E企业),批号为20100417。
1.2 检测试剂和血清 检测PCV2抗体用间接免疫荧光检测板(96孔/块)、PK15细胞空白对照板(96孔/块)均由本实验室制备;FITC标记的羊抗猪IgG为Sigma公司产品;PCV2阳性血清和阴性血清样本,由本实验室鉴定和保存。……
