宋 立，高志强，杨承槐，宁宜宝，张鹤晓，吴 丹，张利峰，刘 洋

(1.中国兽医药品监察所，北京 100081;2.北京出入境检验检疫局，北京 100026)

目前临床常用检测猪链球菌的方法有细菌分离培养和PCR方法［1］。细菌分离培养是传统的诊断、检测方法，所需时间较长，鉴定相对有一定难度。常规PCR方法不能定量，敏感性不够高。荧光PCR技术是20世纪90年代末发展起来的分子生物学检测新技术，其原理是将荧光基团加入PCR反应体系，利用荧光信号累积实时监测整个PCR过程，并能通过标准曲线对未知核酸模板进行定量分析。由于该项技术克服了常规PCR不能定量检测的缺点，且特异性和敏感性较常规PCR大幅提高，因此在医学和兽医领域均得到广泛运用［2－4］。

致病性猪链球菌2型为人畜共患传染病病原菌，在动物中可引起猪的脑膜炎、心内膜炎、关节炎、肺炎和败血症等。该病原致病性强、传播迅速，如果不及时治疗，可导致发病动物急性死亡。猪链球菌病在我国各地时有发生，在局部地区呈暴发势态［5－6］，并常有感染人类的报道［7－8］，给人类健康带来威胁。因此，选择一种快速、灵敏的检测方法用于临床样品检测，及时发现带菌食品和动物，对于猪链球菌病的及时预防和畜产品进出口检验检疫均有重要意义。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 试验菌株

1.1.1.1 猪链球菌2型R735 由加拿大特利尔大学Marcelo Gottschalk教授惠赠，试验浓度CFU为42 ×106/0.1 mL。

1.1.1.2 猪链球菌2型C55606 从中国兽医药品监察所菌种中心领取，试验浓度CFU为52×106/0.1 mL。

1.1.1.3 猪链球菌四川株 中国兽医药品监察所2005年从四川猪链球菌2型发病猪体内分离，经API Strep拭条鉴定为猪链球菌2型。……