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坎地沙坦抑制小鼠视网膜新生血管的实验研究

2011-05-21王嘉俊刘鹤南陈晓隆

实用药物与临床 2011年3期
关键词:小鼠

李 迅,王嘉俊,刘鹤南,陈晓隆

在增殖性视网膜病变的发生、发展过程中,肾素-血管紧张素系统中主要效应介质AngⅡ可能与特异性生长因子(特别是VEGF)相互作用来影响视网膜的发育和功能,最终共同导致视网膜新生血管形成[1]。因此,抑制AngⅡ可能会成为预防和治疗视网膜新生血管的临床方法。本实验探讨RNV发生发展过程中,血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂坎地沙坦抑制RNV的作用。

1 材料和方法

1.1 材料 (1)实验动物:鼠龄为7 d的健康C57BL/6J清洁级新生小鼠(中国医科大学动物部)40只,体质量4.0~5.0 g,性别不限,与哺乳母鼠共同饲养,所有动物均具有动物检疫合格证,无任何眼疾。实验动物及实验条件符合国家科学技术委员会的《实验动物管理条例》。(2)药品试剂:坎地沙坦、BCA蛋白定量试剂盒(美国Pierce公司)、ECL发光试剂盒(美国Pierce公司)、异硫氰酸葡聚糖荧光素(美国Sigma公司)、兔抗小鼠AngⅡ多克隆抗体(美国Sigma公司)、兔抗小鼠VEGF多克隆抗体(美国 Sigma公司)、羊抗兔IgG-HRP(美国Sigma公司)。

1.2 方法 (1)动物分组和模型建立:将40只7 d龄C57BL/6J清洁级新生小鼠随机分为2组:高氧组和坎地沙坦组,每组20只。参照 Smith等[2]的方法建立氧诱导视网膜病变模型,高氧组和坎地沙坦组小鼠及哺乳母鼠置于密闭氧箱中,控制氧浓度为(75% ±2%),5 d(鼠龄12 d)后回到正常空气环境中。小鼠出氧箱后,坎地沙坦组和高氧组每日分别腹腔注射缬沙坦40 mg/kg和等量生理盐水,连续5 d。所有动物保持温度(21±1)℃,光照-黑暗循环/12 h。荧光素血管灌注视网膜铺片:两组鼠龄17 d的小鼠各取3只,将异硫氰酸葡聚糖荧光素溶于1 mL的……

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