王晓杰，陈 荣（江苏常州市第一人民医院，常州市 213003）

糖皮质激素是最早使用的预防和治疗肾移植排斥反应的药物。从20世纪20－80年代，应用于肾移植的免疫抑制剂有了很大的发展，但激素作为基本药物一直是不可替代的。目前糖皮质激素的给药多依据个人经验，而忽略不同患者之间的药动学的差异。内源性糖皮质激素的变化可作为肾移植排斥反应的诊断及判断排斥反应对糖皮质激素冲击治疗是否敏感的指标[1]。为此，笔者建立了测定肾移植患者血清中内源性氢化可的松浓度的方法，现报道如下。

1 材料

1.1 仪器

高效液相色谱系统，包括2996紫外检测器、1525双泵、717自动进样器、Empower色谱工作站（美国Waters公司）；BT25S电子分析天平（德国塞多利斯公司，精密度:1×10－5g）；KTC-16H高速台式离心机（科大创新股份有限公司中佳分公司）；低温冰箱（日本Sanyo公司）；涡旋混合器（上海医科大学仪器厂）。

1.2 试药

可的松对照品（美国Sigma公司，含量:98%，批号:2007117）；氢化可的松对照品（美国Sigma公司，含量:98%，批号:035K1291）；内标:苯巴比妥对照品（中国药品生物制品检定所，批号:171222-200303）；甲醇、乙腈为色谱纯，水为双重蒸馏去离子水，其他试剂均为分析纯。小牛血清（杭州四季青生物公司，批号:050516）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:迪马Diamonsil C18（250mm×4.6mm，5 μm）；流动相:乙腈-水-甲醇（51∶136∶77）；流速 :1.2mL·min－1；检测波长:245 nm；柱温:30 ℃；进样量:30μL。该色谱条件下，血清中的杂质不影响氢化可的松的测定。氢化可的松及内标苯巴比妥的峰保留时间分别为12.2min和7.0min。高效液相色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图A.小牛血清+内标；B.健康者血清+氢化可的松对照品+可的松对照品；……