周作勇，聂 奎，王芝英，秦 波，郭智莉，周雪梅

(1.西南大学荣昌校区动物医学系，重庆 402460；2.西南大学动物科技学院，重庆 400715；3.西南大学蚕学与系统生物研究所，重庆 400715)

机体天然免疫反应的介导主要通过能够识别病原相关分子模式(PAMPs)的模式识别受体(PRR)来完成，其中Toll样受体(TLRs)为最受人们关注的模式识别受体之一[1]。目前公认的TLR信号转导通路分为MyD88依赖和TRIF依赖(或称为MyD88非依赖)两条不同的信号转导途径，其中My88、包含TIR结构域的IFN诱导连接蛋白(TRIF)和包含Toll/IL-1的接头蛋白(TIRAP)为信号转导途径重要的信号传导蛋白[2]。在信号传导中，大部分的TLR通过MyD88依赖转导信号，然而TLR3和TLR4还存在另外一种TRIF依赖信号途经。此外，TLR2和TLR4不能像其他TLR分子一样直接与MyD88接头，而需要TIRAP共接头分子的参与[1]。MyD88主要通过其死亡结构域(DD)与白介素受体相关激酶(IRAK)家族蛋白分子结合成为信号转导复合物，该复合物继续募集并活化下游肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)，然后激活IκB激酶复合物，最终导致NF-κB活化，激活相关促炎因子和I型干扰素的基因表达。而TRIF主要通过募集TRAF3和TRAF6分别通过 TBK1和 TAK1来引起 NF-κB的活化及IRF3和IRF7的核转位，调控炎性因子和I型干扰素的表达[1,3-5]。

与哺乳动物相比，鸡TLR的鉴定较晚，鸡TLR受体信号传导蛋白的研究较少，仅见有部分关于鸡MyD88在雏鸡免疫和感染沙门氏菌TLR信号传导作用的研究报道[6-7]。本实验建立了检测鸡MyD88、TRIF和TIRAP基因表达的实时荧光定量PCR方法，为研究鸡MyD88、TRIF和TIRAP在TLR识别病原后的信号传导机制奠定基础。

1 材料和方法

1.1 试验动物、主要试剂及仪器 1日龄罗曼雏鸡购自内江市种鸡场，饲喂于经严格消毒的鸡笼中，饮水经煮沸消毒，饲喂雏鸡全价饲料。……