宦海霞，张 科，陈 祥，高 崧*，刘秀梵

(1.淮阴师范学院生命科学学院，江苏 淮安 223300；2.扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室，江苏 扬州 225009；3.淮安出入境检验检疫局，江苏 淮安 223300)

禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli，APEC)可引起家禽呼吸道感染(气囊炎和肺炎)、心包炎、肝周炎和败血症等局部或全身性感染，给养禽业造成严重的经济损失。APEC和尿道致病性大肠杆菌(Uropathogenic Escherichia coli，UPEC)均能够引起广泛流行的肠道外疾病，这与其毒力特性有关。已知的毒力因子包括血清型、黏附素、铁获得系统、毒素、保护素和侵袭素等，这些毒力因子使它们能够在宿主环境中生存进而造成宿主发病[1-5]。因此，UPEC和APEC可能在适应肠道外的生活方式上有相似之处，并体现在毒力基因的组成和表达上。

本研究利用基因芯片技术对APEC E058株毒力基因在鸡体内、外不同培养条件下进行差异表达检测，同时对E058与UPEC HEC4株在LB和人尿液中培养条件下的差异表达基因进行检测，探讨毒力基因、潜在毒力基因在E058菌株中的表达差异，为寻找APEC新的致病基因和探索APEC与UPEC相关性提供依据。

1 材料和方法

1.1 菌株及实验动物 APEC E058株(O2血清型)由本实验室分离、鉴定并保存[6-7]；人UPEC分离株HEC4由扬州市第一人民医院奚群英医生惠赠；实验鸡由山东家禽所购进SPF种蛋孵化获得。

1.2 主要试剂、芯片及仪器 采自25岁～30岁的2个月内未服用抗生素类药物的健康妇女的尿液，经过滤除菌后用于细菌培养；DNA Marker、Taq酶和Klenow酶购自TaKaRa公司；PCR试剂盒和dNTP购自Promega公司；Cy5-dCTP(红色)和Cy3-dCTP(绿色)均购自Amersham公司；9 mer Random Primer购自上海英骏生物技术有限公司；……