石 跃，刘怀然，刘培欣，李东伟，杨 煦，华育平，孔宪刚*

(1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室，黑龙江 哈尔滨 150001；2.东北林业大学野生动物资源学院，黑龙江 哈尔滨 150040；3.哈尔滨师范大学生命科学与技术学院，黑龙江 哈尔滨 150025)

新城疫(Newcastle disease，ND)是由 ND病毒(NDV)引起，主要危害家禽的一种急性、高度接触性传染病[1]。我国对ND的防控采用的是严格的疫苗免疫，已经基本上控制了ND的流行，但与此同时来自疫苗的免疫压力和宿主的选择压力也加速了NDV的变异。近年来不断有高水平免疫鸡群发生病例，以及NDV感染家养水禽鸭、鹅发病的报道。野生水禽被认为是NDV的天然宿主，体内多携带对鸡无致病性的NDV弱毒株，但有证据表明家禽爆发ND与持续存在于野鸟体内的NDV有关[2]。本研究对从黑龙江地区获得的一株野鸭源NDV分离株进行生物学特性鉴定，表明该病毒株的ICPI值达到强毒株的标准，而基因组测序结果显示它与疫苗株Mukteswar同源性很高。本研究为进一步了解野鸟源病毒株与疫苗株的潜在关系提供依据。

1 材料和方法

1.1 主要材料 NDV Mallard/CH/HLJ383/06(简称WB383)，分离于2006年采自黑龙江三江自然保护区野生绿头鸭泄殖腔拭子，拭子样品由东北林业大学提供；9日龄～10日龄SPF鸡胚、1日龄及15日龄SPF鸡均由哈尔滨兽医研究所实验动物中心提供；NDV标准强毒株(F48E9)阳性血清、DH5α感受态细胞由本实验室保存；TRIzol reagent购自Invitrogen公司；M-MLV购自MBI Fermentas公司；ExTaq、dNTP、pMD18-T均购自TaKaRa公司；DNA胶回收试剂盒购自上海生工生物工程技术服务有限公司。……