高效液相色谱法测定佛手配方颗粒中橙皮苷的含量
2011-05-07吴怀恩卢澄生刘圆圆甄汉深
吴怀恩,辛 华,卢澄生,刘圆圆,甄汉深,黄 莉
(1.广西中医学院,广西 南宁 530001;2.成都中医药大学,四川 成都 611137)
佛手为芸香科植物佛手(Citrus medica L.var.sarcodactylis Swingle)的干燥果实,又称佛手柑。性温,味辛、苦、酸,归肝、脾、肺经。具有疏肝理气、和胃止痛的功效,用于肝胃气滞,胸肋胀痛,胃脘痞满,食少呕吐等症[1]。佛手配方颗粒是佛手饮片经水提、浓缩、干燥、制粒等工序制成的单味中药配方颗粒剂。据报道[2-4],橙皮苷是佛手饮片的主要有效成分,具有抗氧化、抗炎、维持血管正常渗透压、增强毛细血管韧性、降血脂和抗肿瘤等多种活性。2005年版《中国药典》仅规定佛手药材的显微鉴别和薄层色谱鉴别,并未见含量测定。本文以高效液相色谱法(HPLC)测定制剂中橙皮苷的含量,为制定其质量标准提供依据。
1 仪器和试药
1.1 仪器
Agilent 1100高效液相色谱仪(美国安捷伦科技公司);LG16-W型高速离心机(北京医用离心机厂);B3500S-MT超声清洗仪(上海必能信超声有限公司);BP211D电子分析天平(德国赛多利斯)。
1.2 试药
橙皮苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号:0721-9909);佛手配方颗粒(江阴天江药业有限公司,批号:0901041、0903054、0905115);甲醇为色谱纯,水为高纯水,其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:Shim-pack VP-ODS柱(250 mm ×4.6 mm,5 μm),流动相:甲醇-0.1% 磷酸溶液(35∶65),流速:1.0 mL/min,检测波长:284 nm,柱温:40 ℃,理论板数按橙皮苷峰计算应不低于4000。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取橙皮苷对照品5.60 mg,置50 mL量瓶中,加甲醇溶解并定容,摇匀,得对照品贮备液(0℃保存)。精密吸取5 mL置10 mL量瓶中,加甲醇定容,摇匀,使成每1 mL含橙皮苷56 μg的甲醇溶液,即得。
2.2.2 供试品溶液的制备 取佛手配方颗粒约2.0 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加甲醇10 mL,密塞,称定重量,超声提取60 min,放冷,称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,即得。……
