胡晓倩，陈来同，赵 健

(北京大学 生命科学学院，北京 100871)

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色方法

胡晓倩，陈来同，赵 健

(北京大学 生命科学学院，北京 100871)

目的 建立一种操作简便、快速、灵敏度高、无毒的蛋白质电泳染色方法。方法 利用考马斯亮蓝G-250(CBB G-250)在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后对蛋白质条带进行染色，对不同染色条件进行探讨，并与考马斯亮蓝R-250(CBB R-250)染色法进行比较。结果 CBB G-250染色法试剂无毒，背景浅，经改良其灵敏度与CBB R-250染色法相当，达到0.1～0.5μg。结论 CBB G-250染色方法简单经济，灵敏度能够满足一般要求，适用于蛋白质电泳结果的快速分析。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳;染色方法;考马斯亮蓝G-250;灵敏度

蛋白质条带染色是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中的重要步骤，染色方法有多种［1］，考马斯亮蓝R-250(CBB R-250)(三苯基甲烷)染色法是生化实验室中蛋白质电泳检测和定量分析常用的方法。考马斯亮蓝G-250(CBB G-250)分子结构略有不同，是一种甲基取代的三苯基甲烷，广泛应用于蛋白质溶液浓度测定［2］，因其电泳染色灵敏度稍差，应用较少。研究表明，酸性条件下CBB G-250分子的芳香环结构通过疏水相互作用形成聚集体［3］，在电泳染色中染料是以聚集体的形式与蛋白质结合，高浓度的硫酸铵可以使染料分子的聚集体增加，提高染色灵敏度并降低背景［4-5］，用中性盐作为脱色液可以快速无毒地达到很好的效果［6］。本文以 Bradford CBB G-250的染色液［2］为基础，对SDS-PAGE凝胶的染色条件进行探讨和改良，力求建立一种更简便快速、灵敏的蛋白质条带染色方法。

1 材料

大……