CEACAM1和VEGF在人脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤血管生成的关系
2011-04-26许刚柱刘凯歌张俊锋丁志斌盛旭东西安医学院附属医院神经外科西安710077通讯作者mailkaigeliugmailcom
许刚柱, 刘凯歌, 张俊锋, 丁志斌, 张 鹏, 付 强, 盛旭东 (西安医学院附属医院神经外科, 西安 710077;通讯作者,E-mail:kaigeliu@gmail.com)
脑胶质瘤的发病率位居颅内原发性肿瘤首位,呈恶性侵袭性发展,其中广泛间质微血管形成是胶质瘤生长的生物学基础,但目前关于胶质瘤血管生成的机制尚不清楚。癌胚抗原相关细胞黏附分子1(carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1,CEACAM1)是癌胚抗原(CEA)基因家族成员之一,对体内外血管生成分析显示,CEACAM1有血管生成活性[1],血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是促进肿瘤血管生成的最主要因子之一,CD105则是一种主要表达于新生血管内皮细胞上的糖蛋白,是目前最好的血管标志物[2]。本研究采用免疫组化法检测正常脑组织及胶质瘤中 CEACAM1、VEGF和 CD105标记的MVD表达情况,探讨CEACAM1、VEGF与胶质瘤血管生成的关系。
1 资料与方法
1.1 研究对象 收集2008-04~2010-04西安医学院附属医院及西京医院神经外科手术切除并经病理检查证实的人脑胶质瘤石蜡标本62例,其中男性35例,女性27例,年龄17-73岁(平均43.5岁)。所有标本常规切片,HE染色后根据2000年WHO中枢神经系统肿瘤分类标准分类,其中Ⅰ级14例,Ⅱ级17例,Ⅲ级18例,Ⅳ级13例。另取因颅脑损伤行内减压术患者15例的正常脑组织作为对照(与家属沟通后签字同意用作科学研究,并经医院伦理委员会审批同意)。
1.2 主要试剂及方法 兔抗人CEACAM1单克隆抗体购自美国Epitomics公司,鼠抗人VEGF单克隆抗体购自美国Labvision公司,鼠抗人CD105单克隆抗体购自北京中杉金桥生物技术公司,免疫组化SP试剂盒购自北京中杉生物技术公司。采用SP法检测,按常规步骤进行,兔抗人CEACAM1单克隆抗体滴度为1∶70,鼠抗人 VEGF单克隆抗体滴度为1∶50,鼠抗人 CD105 单克隆抗体滴度为 1∶50,以PBS代替一抗作为阴性对照,用已知阳性标本作为阳性对照。……
