齐芬芳，冉雪琴，王嘉福，

(1.贵州大学农业工程省重点实验室，贵州 贵阳550025； 2.贵州大学动物科学学院，贵州 贵阳550025)

腺苷酸激酶(adenylate kinase，ADK)是生物体内一种重要的核苷酸激酶，属于磷酸果糖激酶B家族[1-2]。主要催化ADP的生成，反应式为AMP + Mg2+ATP↔ADP + Mg2+ADP。腺苷酸激酶广泛存在于微生物、植物以及动物体内。所有腺苷酸激酶由3个结构域组成：CORE、AMPbd(AMP-binding subdomain)和LID(ATP-binding subdomain)结构域。根据LID结构域的长度将腺苷酸激酶分为长亚型和短亚型。底物分子与腺苷酸激酶结合后LID结构域发生很大变化，并覆盖整个活性位点，保护Mg2+ATP/AMP和酶形成的三元复合体，协助磷酰基的转移和防水解[3]。腺苷酸激酶以ATP或GTP作为磷酸根的供体，维持细胞中3种腺苷酸的正常水平，对能量代谢和酶活性的调节起重要作用[4]。本研究中，施氏假单胞菌(Pseudomonasstutzeri)75为贵州大学农业工程省重点实验室分离到的一株有机磷农药降解菌，能以毒死蜱作为唯一碳源生长。ADK在需要高水平ATP合成和利用的细胞中大量存在并参与细胞中的能量代谢和核苷酸代谢，低等生物要应对多变的外界环境以及激烈的生存竞争，必然要求高度的腺苷酸激酶活性用以维持体内的能量代谢平衡。而关于农药降解菌中的腺苷酸激酶基因鲜有报道。本研究以一株毒死蜱降解菌75为研究材料，克隆ADK基因并对其结构特点进行分析，以期为后续的研究奠定一定的基础。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1菌株来源 施氏假单胞菌75为贵州大学农业工程省重点实验室分离的毒死蜱降解菌[5]。

1.1.2主要试剂 T4DNA连接酶、Taq DNA聚合酶、载体pMD18-T为TaKaRa公司产品；……