林 静，侯巧燕，农林琳，乐江华*

(1桂林医学院附属医院，广西 桂林 541001;2桂林医学院)

宫颈鳞状细胞癌的发生和发展是一个复杂的病理过程，经历从正常上皮→子宫颈上皮内瘤变→子宫颈癌几个阶段。2008年1月～2009年10月，我们采用免疫组化法检测了宫颈鳞状细胞癌组织中线粒体促凋亡蛋白(Smac)、存活蛋白(Livin)的表达，旨在进一步了解宫颈鳞状细癌的发生、发展机制。

1 材料与方法

1.1 材料 选取桂林医学院附属医院手术切除的宫颈鳞状细胞癌组织标本12份(宫颈癌组)，均为女性，年龄5～57岁。所有病例均经病理确诊，且术前均未行放、化疗。另选32份宫颈上皮内瘤变组织(内瘤变组)和9份正常宫颈组织(正常组)作对照。三组一般资料无统计学差异。主要试剂:组织芯片(桂林泛普生物技术有限公司协助制作)，免疫组化染色多克隆抗体Smac(美国Santa Cruz Biotechnology公司)，免疫组化染色多克隆抗体Livin(武汉博士德公司)，二抗试剂盒(福建迈新公司)。

1.2 Smac、Livin表达检测 所有标本均经10%甲醛液固定，常规石蜡包埋。用特制的组织芯片制作器，将以上组织蜡块制作成组织芯片，共53个组织芯粒，星形细胞瘤Ⅲ级1例，备用。每芯直径1.5 mm，厚度4 μm。采用成人胃标本组织切片作为阳性对照。免疫组化染色操作严格按试剂盒说明书进行，DAB显色，苏木精复染，抗原修复。用已知阳性胃组织标本作阳性对照;以PBS代替一抗作阴性对照。一张组织芯片染一种抗体，用1张芯片做常规HE染色对照。结果判断标准:Smac及Livin阳性细胞均为胞质着色，均呈棕黄色。参照Bachtiary等［1］方法，高……