李先军，李 强，杜 超，王树艳

（1.承德医学院，河北承德 067000；2.承德医学院附属医院）

Bt野生菌Q1杀虫晶体蛋白及基因型分析

李先军1，李 强1，杜 超1，王树艳2

（1.承德医学院，河北承德 067000；2.承德医学院附属医院）

目的:分析我国千山地区森林地带土壤中分离的野生菌Q1的32类杀虫晶体蛋白基因类型和表达蛋白。方法:利用PCR-RFLP鉴定体系和SDS-PAGE蛋白分析方法，以JM110为受体菌、PMD-18T为克隆载体对cry7基因的同源区段进行克隆测序。结果:Q1同时含有cry1、cry7、cry16基因，同时表达了130kD、90kD和60kD蛋白。电镜观察显示晶体形状多为菱形或长菱形。测序后与模式基因比对相似性均在89%以上。结论:该实验为克隆cry7全长基因奠定了研究基础，丰富了菌株及基因资源，在资源积累方面具有重要意义。

苏云金芽孢杆菌；杀虫晶体蛋白；cry基因；RCR-RFLP

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis，简称Bt)是目前害虫生物防治、植物抗虫育种中研究较为深入，应用较为广泛，经济效益、生态效益和社会效益较明显的一类微生物。研究表明，Bt菌株的杀虫活性与其携带的编码ICP的cry基因密切相关，其杀虫活性范围已从鳞翅目扩大到双翅目、鞘翅目、直翅目和膜翅目等9个目的昆虫。由于对人畜无害，不污染环境，是目前世界各国害虫防治的重要手段之一，已广泛应用于农、林、卫生害虫的生物防治。因此，筛选高效、广谱、新型Bt杀虫菌株，以及发现新杀虫毒素蛋白基因均有着十分重要的理论意义和实践价值[1]。1996年Cuo和Chak将PCR-RFLP(又称CAPS)新技术应用于Bt cryl类基因的鉴定；1997年宋福平等在国内建立了cry2-cry11等Bt常见基因类型的CAPS鉴定体系[2]。……